Category Archives: Microbiology

Límites de biocontaminación en superficies

J Pharm Pharmacogn Res 4(3): 115-121, 2016.

Short Communication | Comunicación Corta

Determinación de los límites de la contaminación microbiana presente en superficies de un laboratorio de referencia distrital de microbiología farmacéutica

[Limits determination of microbial contamination present on surfaces from a pharmaceutical microbiology district reference laboratory]

Natalia Charry*, Sandra L. Gómez

Laboratorio de Salud Pública. Dirección de Epidemiología, Análisis y Gestión de Políticas en Salud Colectiva. Secretaría Distrital de Salud, Bogotá, Colombia.
Abstract

Context: The bioburden present on the pharmaceutical microbiology laboratory’s surfaces, may increase the risk of cross-contamination when analytical tests are being carried out; periodic monitoring allows to set limits that reduce the risk.

Aims: To determinate the limits of bioburden present on seven surfaces of the pharmaceutical microbiology laboratory, after the cleaning and disinfection process.

Methods: The swabbing method was used for sampling. With a 25 cm2 stencil and a sterile swab, a sample was taken, passing the swab over five points of every surface chosen. A total aerobic microbial count and a total yeast and mold count was done. Finally, the average and the standard deviation of the counts was obtained.

Results: The average from the counts obtained on each surface selected for the study, were below the recommended limits by international entities like the World Health Organization and the European Union, between others; also, the results generated in this study, allow to classify the biosafety cabinet as an ISO 5 area and the other areas as ISO 7.

Conclusions: Bioburden levels on the tested surfaces are considered low, reducing the risk of cross-contamination, which could have a negative impact on laboratory’s activities. Also, it follows that disinfectant concentration used, is effectively.

Keywords: Controlled environment: cross-contamination; disinfection; surfaces sampling.

Resumen

Contexto: La presencia de carga microbiana en las superficies de un laboratorio de microbiología farmacéutica, puede aumentar el riesgo de contaminación cruzada durante el desarrollo de las pruebas analíticas; realizar monitoreos periódicos permite establecer límites que disminuyan dicho riesgo.

Objetivos: Determinar los límites de la contaminación microbiana presente en siete superficies del laboratorio de microbiología de medicamentos, después de llevar a cabo el proceso de limpieza y desinfección.

Métodos: Se empleó el método de hisopado para la toma de las muestras. Con la ayuda de un hisopo estéril y una plantilla de 25 cm2, se tomaron muestras en cinco puntos de cada superficie. Se realizó el recuento de microorganismos mesófilos aerobios, mohos y levaduras. Por último, se obtuvo el promedio y desviación estándar de los recuentos.

Resultados: El promedio de los recuentos obtenidos en todas las superficies objeto de estudio, se encontraron por debajo de los límites recomendados por entes internacionales como la Organización Mundial de la Salud y la Unión Europea, entre otras; así mismo, los resultados generados, permiten clasificar la cabina de bioseguridad como un área ISO 5 y las demás áreas como ISO 7.

Conclusiones: Se considera que los niveles de contaminación microbiana presente en las superficies evaluadas son bajos, disminuyendo el riesgo de contaminación cruzada que afecte las actividades propias del área; así mismo, se infiere que la concentración del desinfectante usado es efectiva.

Palabras Clave: Ambiente controlado; contaminación cruzada; desinfección; muestreo de superficies.

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Citation Format: Natalia Charry, Sandra L. Gómez (2016) Determinación de los límites de la contaminación microbiana presente en superficies de un laboratorio de referencia distrital de microbiología farmacéutica. | [Limits determination of microbial contamination present on surfaces from a pharmaceutical microbiology district reference laboratory]. J Pharm Pharmacogn Res 4(3): 115-121.

© 2016 Journal of Pharmacy & Pharmacognosy Research (JPPRes)

Anti-adhesion and antibiotic modulation of grapefruit juice and seed extract

J Pharm Pharmacogn Res 4(1): 25-38, 2016.

Original Article | Artículo Original

Anti-adhesion and antibiotic modulatory evaluation of grapefruit (Citrus paradisi) juice and seed extract on bacteria isolated from urine and catheter

[Anti-adhesión y evaluación moduladora de antibióticos de jugo y extracto de semilla de pomelo (Citrus paradisi) sobre bacterias aisladas de orina y catéter]

Michael Oluwole Osungunna1* and Grace O. Onawunmi2

Department of Pharmaceutics, Faculty of Pharmacy, Obafemi Awolowo University, Ile-Ife, Nigeria.
Abstract

Context: The in vivo use of grapefruit seed in the treatment of urinary tract infections (UTIs) has been reported but the mechanism of action is yet to be explained.

Aims: Evaluate the anti-adhesion and antibiotic modulatory activities of grapefruit seed extract and juice as their possible mechanisms of action.

Methods: Sub-inhibitory concentrations of 2.5 and 5 mg/mL as well as 10.3 and 5.15 mg/mL of grapefruit seed extract and juice respectively were evaluated for modulatory activity of ciprofloxacin, streptomycin and nalidixic acid against one hundred and twenty seven bacterial isolates from mid-stream urine (MSU) (100), catheter-stream urine (CSU) (14) and catheter tips (CT) (13) using the agar dilution method. Anti-adhesion activity of grapefruit seed extract and juice at sub-inhibitory concentrations of 2.5 and 1.03 mg/mL respectively was evaluated against twenty three (23) moderately adherent bacterial isolates from MSU (10), CSU (7) and CT (6) using the tissue culture plate method.

Results: The results revealed that grapefruit juice (5.15 mg/mL) showed more effect on nalidixic acid activity than seed extract (2.5 mg/mL). Grapefruit juice showed more anti-adhesion activity than grapefruit seed extract at the concentration tested.

Conclusions: The study concluded that grapefruit seed extract and juice had anti-adhesion and antibiotic modulatory effects on bacteria associated with UTIs.

Keywords: Anti-adhesion, catheter-stream urine, catheter tips, mid-stream urine, modulatory effect, urinary tract infections.

Resumen

Contexto: El uso in vivo de la semilla de pomelo se ha informado en el tratamiento de la infecciones del tracto urinario (ITU), pero aún no se ha explicado el mecanismo de acción por el que ocurre este beneficio.

Objetivos: Evaluar la anti-adherencia y actividades moduladoras de antibióticos del extracto de semilla y el zumo de pomelo como sus posibles mecanismos de acción.

Métodos: Concentraciones sub-inhibitorias de 2,5 y 5 mg/mL, así como 10,3 y 5,15 mg/mL de extracto de semilla de pomelo y el jugo, respectivamente fueron evaluados para demostrar la actividad moduladora de la ciprofloxacina, estreptomicina y ácido nalidíxico en contra de ciento veintisiete aislamientos bacterianos desde orina corriente (MSU) (100), catéter de orina (CSU) (14) y puntas de catéter (CT) (13) utilizando el método de dilución en agar. La actividad anti-adherencia del extracto de semilla y el jugo de pomelo a concentraciones sub-inhibitoria de 2,5 y 1,03 mg/mL, respectivamente, se evaluó frente a veintitrés (23) aislamientos bacterianos moderadamente adherentes a partir de MSU (10), CSU (7) y CT (6) utilizando el método de la placa de cultivo de tejidos.

Resultados: Los resultados revelaron que el zumo de pomelo (5,15 mg/mL) mostró más efecto sobre la actividad del ácido nalidíxico que el extracto de semilla (2,5 mg/mL). El jugo mostró una mayor actividad anti-adhesión que el extracto de semilla de pomelo a la concentración probada.

Conclusiones: El extracto de semilla y el jugo de pomelo tuvieron efectos anti-adherente y moduladores de antibióticos en las bacterias asociadas con las infecciones urinarias.

Palabras Clave: Anti-adhesión; catéter de flujo de orina; efecto modulador; flujo medio de orina; infecciones del tracto urinario; punta de catéter.

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Citation Format: Michael Oluwole Osungunna and Grace O. Onawunmi (2016) Anti-adhesion and antibiotic modulatory evaluation of grapefruit (Citrus paradisi) juice and seed extract on bacteria isolated from urine and catheter. J Pharm Pharmacogn Res 4(1): 25-38.

© 2016 Journal of Pharmacy & Pharmacognosy Research (JPPRes)

 

Antimicrobial activities of Ochna schweinfurthiana stem extracts

J Pharm Pharmacogn Res 3(6): 171-182, 2015.

Original Article | Artículo Original

Phytochemical analysis and antimicrobial activities of methanolic stem extracts of Ochna schweinfurthiana F.Hoffm.

[Análisis fitoquímico y actividad antimicrobiana de extractos metanólicos del tallo de Ochna schweinfurthiana F.Hoffm.]

Umar Mukhtar Danmusa1, Idris Abdullahi Nasir2*, Musa I. Abdullahi1, Auwal Alkasim Ahmad3, Ibrahim S. Abdulkadir4

1Faculty of Pharmaceutical Sciences, Usmanu Danfodiyo University, Sokoto, Sokoto State, Nigeria.
2Department of Medical Microbiology, University of Abuja Teaching Hospital, PMB 228 Gwagwalada. FCT Abuja, Nigeria.
3Faculty of Pharmacy, Ahmadu Bello University, Zaria, Kaduna State, Nigeria.
4Faculty of Pharmacy, University of Maiduguri, Maiduguri. Borno State, Nigeria.
Abstract

Context: Medicinal plants are an enormous source of alternative antimicrobial therapy, particularly in this era of emerging resistance against orthodox antimicrobial agents.

Aims: To evaluate the phytochemical and antimicrobial activities of methanolic stem extracts of Ochna schweinfurthiana F.Hoffm. and various fractions (chloroform, n-hexane, ethyl acetate, and n-butanol) obtained through liquid-liquid partition.

Methods: The basic phytochemistry assay and disc diffusion/broth dilution techniques were used. The microorganisms tested were pure isolates of Methicillin Resistance Staphylococcus aureus, Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, Salmonella typhi, Shigella dysenteriae, Klebsiella pneumonia, Neisseria gonnorhea, Pseudomonas aeruginosa, Corynebacterium ulcerans, Bacillus subtilis, Escherichia coli, Proteus mirabilis, Candida albicans, Candida tropicalis, Candida stellatoidea and Candida krusei.

Results: Thin layer chromatography results showed 13 prominent coloured spots from chloroform extract using dichloromethane/methanol 10:1 as the solvent system.  The crude extract revealed the presence of flavonoids, saponins, tannins, glycosides and steroids/terpenes. Antimicrobial susceptibilities and zones of inhibition (ZI) findings showed that stem extracts inhibited growth of all microbes at ZI range of 22 – 29 mm except C. ulcerans, B. subtilis, E. coli, P. mirabilis, C. stellatoidea and C. krusei. It was observed that chloroform fraction had the highest antimicrobial activities with minimum inhibitory concentration of 1.25 mg/mL against all susceptible pathogens except P. aeruginosa (2.5 mg/mL).

Conclusions: Ochna schweinfurthiana F.Hoffm. stem contains bioactive constituents with potent antimicrobial activities at low MIC, especially in the chloroform soluble fraction. This study validates and encourages the ethnomedicinal use of this plant in treating infections caused by these susceptible microbes.

Keywords: Antimicrobial; bioactive constituents; Ochna schweinfurthiana; Nigeria; pathogens.

Resumen

Contexto: Las plantas medicinales son una enorme fuente para la terapia antimicrobiana alternativa en esta era de resistencia emergente contra los agentes antimicrobianos ortodoxos.

Objetivos: Evaluar la fitoquímica y la actividad antimicrobiana de extractos metanólicos de tallos de Ochna schweinfurthiana F.Hoffm. y varias fracciones (cloroformo, n-hexano, acetato de etilo y n-butanol) obtenidas a través de la partición líquido-líquido.

Métodos: Se utilizaron ensayos básicos fitoquímicos y técnicas de difusión en disco/caldo. Los microorganismos probados fueron aislados de Staphylococcus aureus resistentes a meticilina, Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, Salmonella typhi, Shigella dysenteriae, Klebsiella pneumonia, Neisseria gonnorhea, Pseudomonas aeruginosa, Corynebacterium ulcerans, Bacillus subtilis, Escherichia coli, Proteus mirabilis, Candida albicans, Candida tropicalis, Candida stellatoidea y Candida krusei.

Resultados: Los resultados de la cromatografía en capa fina mostraron 13 manchas coloreadas en el extracto clorofórmico mediante un sistema de disolventes diclorometano/metanol 10:1. El extracto crudo reveló la presencia de flavonoides, saponinas, taninos, glicósidos y esteroides/terpenos. El extracto de tallos inhibió el crecimiento de todos los microorganismos con zonas de inbición entre 22 – 29 mm, excepto C. ulcerans, B. subtilis, E. coli, P. mirabilis, C. stellatoidea y C. krusei. La fracción clorofórmica tuvo una mayor actividad antimicrobiana con una concentración inhibitoria mínima de 1,25 mg/mL contra todos los patógenos susceptibles, excepto P. aeruginosa (2,5 mg/mL).

Conclusiones: El tallo de Ochna schweinfurthiana F.Hoffm. contiene constituyentes bioactivos con potente actividad antimicrobiana, especialmente en la fracción clorofórmica soluble. Este estudio valida y promueve el uso ethnomedicinal de esta planta en el tratamiento de infecciones causadas por estos microorganismos susceptibles.

Palabras Clave: Antimicrobiano; constituyentes bioactivos; Ochna schweinfurthiana; Nigeria; parógenos.

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Citation Format: Umar Mukhtar Danmusa, Idris Abdullahi Nasir, Musa I. Abdullahi, Auwal Alkasim Ahmad, Ibrahim S. Abdulkadir (2015) Phytochemical analysis and antimicrobial activities of methanolic stem extracts of Ochna schweinfurthiana F.Hoffm. J Pharm Pharmacogn Res 3(6): 171-182.

© 2015 Journal of Pharmacy & Pharmacognosy Research (JPPRes)

Phytochemical investigation and antimicrobial activity of Vernonia auriculifera

J Pharm Pharmacogn Res 3(6): 141-147, 2015.

Original Article | Artículo Original

Phytochemical investigation and antimicrobial activity of leaves extract of Vernonia auriculifera Hiern

[Investigación fitoquímica y actividad antimicrobiana de extractos de hojas de Vernonia auriculifera Hiern]

Bekele Albejo1, Milkyas Endale2*, Belayhun Kibret3**, Mathewos Anza4

1Department of Chemistry, College of Natural and Computational Sciences, Dilla University, P.O.Box 419, Dilla, Ethiopia.
2Department of Chemistry, College of Natural and Computational Sciences, Hawassa University, P.O.Box 05, Hawassa, Ethiopia.
3Department of Biochemistry, College of Medicine and Health Sciences, Hawassa University, Hawassa, Ethiopia.
4Department of Chemistry, Faculty of Natural and Computational Sciences, Wolaita Sodo University, P.O.BOX 238, Wolaita Sodo, Ethiopia.
Abstract

Context: The genus Vernonia is one of the largest groups in the family Compositae constituting more than 500 species distributed widely in tropical and sub-tropical regions of Africa, Asia, and America. Traditionally the genus is used for the treatment of schistosomiasis, amoebic dysentery, gastrointestinal problems, malaria, venereal diseases, wounds, hepatitis, and diabetes. Vernonia auriculifera Hiern is used for healing wounds as ointment around the injured areas.

Aims: To investigate the phytochemical constituents and evaluate antimicrobial activity of leaves extract of Vernonia auriculifera Hiern.

Methods: Phytochemical screening tests were conducted to identify the class of compounds present in the leaves extracts of V. auriculifera. Silica gel column chromatographic technique was applied to separate the constituents of the extracts. Various spectroscopic techniques (IR, 1H NMR, 13C NMR, DEPT-135, COSY, gHSQC, and gHMBC) were applied to determine the structures of isolated compounds.

Results: Phytochemical screening of the methanol leaf extract revealed the presence of tannins, flavonoids, terpenoids, saponins and absence of anthraquinones, steroids, and alkaloids. Silica gel column chromatography of the methanol leaves extract yielded one compound. The hexane, chloroform, methanol and water extracts were tested against Staphylococcus aureus. The methanol and water extracts showed promising growth suppression at minimum inhibitory concentration of 200 mg/mL.

Conclusions: The polar extracts of the leaves of Vernonia auriculifera Hiern possess antimicrobial activity.

Keywords: Antimicrobial activity; phytochemical screening; Staphylococcus aureus; terpenoids; Vernonia auriculifera.

Resumen

Contexto: El género Vernonia es uno de los mayores grupos en la familia Compositae, constituyendo más de 500 especies distribuidas ampliamente en las regiones tropicales y sub-tropicales de África, Asia y América. Tradicionalmente el género es usado para el tratamiento de esquistosomiásis, disentería amébica, problemas gastrointestinales, malaria, enfermedades venéneras, heridas, hepatitis y diabetes. Vernonia auriculifera Hiern es usada para cicatrizar heridas como ungüento alrededor de las áreas dañadas.

Objetivos: Investigar los constituyentes fitoquímicos y evaluar la actividad antimicrobiana de los extractos de hojas de Vernonia auriculifera Hiern.

Métodos: Pruebas de cribado fitoquímico fueron conducidas para identificar metabolitos de los extractos de hojas de V. auriculifera. Columnas cromatográficas de sílica gel fueron utilizadas para separar los constituyentes de los extractos. Varias técnicas espectroscópicas (IR, 1H NMR, 13C NMR, DEPT-135, COSY, gHSQC, and gHMBC) fueron aplicadas para determinar las estructuras de los compuestos aislados.

Resultados: El cribado fitoquímico del extracto metanólico de las hojas reveló la presencia de taninos, flavonoides, terpenoides, saponinas y ausencia de atraquinonas, esteroides y alcaloides. Mediante columna cromatográfica de sílica gel del extracto metanólico de las hojas fue aislado un compuesto. Los extractos en hexano, cloroformo, metanol y agua fueron probados contra Staphylococcus aureus. Los extractos metanólico y acuoso mostraron supresión del crecimiento a la concentración mínima inhibitoria de 200 mg/mL.

Conclusiones: Los extractos polares de las hojas de Vernonia auriculifera Hiern poseen actividad antimicrobiana.

Palabras Clave: Actividad antimicrobiana; cribado fitoquímico; terpenoides; Staphylococcus aureus; Vernonia auriculifera.

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Citation Format: Albejo B, Endale M, Kibret B, Anza M (2015) Phytochemical investigation and antimicrobial activity of leaves extract of Vernonia auriculifera Hiern. J Pharm Pharmacogn Res 3(6): 141-147.
This article has been cited by:
Odongo E, Mungai N, Mutai P, Karumi E, Mwangi J, Omale J (2018) Ethnobotanical survey of the medicinal plants used in Kakamega County, western Kenya. Applied Medical Research 4(2): 22-40. DOI: 10.5455/amr.20180315095706
Odongo EA (2016) An ethnobotanical, antioxidant and anti-inflammatory study of medicinal plants used in Kakamega County, Western Kenya. A thesis submitted in partial fulfilment of the requirements for the award of the degree for Master of Science in Pharmacognosy and Complementary Medicine of the Department of Pharmacology and Pharmacognosy, School of Pharmacy, University of Nairobi. Website

© 2015 Journal of Pharmacy & Pharmacognosy Research (JPPRes)

Control of dental biofilm microorganisms by C. illinoinensis, Q. rubra and S. glyciphylla

J Pharm Pharmacogn Res 3(5): 118-129, 2015.

Original Article | Artículo Original

Effect of Carya illinoinensis, Quercus rubra and Smilax glyciphylla extracts, pectin, and papain on the dental biofilm microorganisms

[Efecto de extractos de Carya illinoinensis, Quercus rubra y Smilax glyciphylla, pectina y papaina sobre los microorganismos de la placa dental]

Elda P. Segura1*, Luis Méndez2, Eréndira Márquez1, Alejandra I. Vargas1, Karla M. Gregorio1, José L. Martínez1, Anna Ilyina1

1Nanobioscience Group, Chemistry School; 2Dentistry School. Coahuila Autonomous University. Blvd. V. Carranza e Ing. J.C. Valdés, CP 25280, Col. República, Saltillo, Coahuila, México.
Abstract

Context: Dental caries is an infectious disease resulting in destruction of tooth structure by acid-forming bacteria found in dental plaque and intraoral biofilms, which are made up of mixed-species microbial communities, and their uncontrolled outgrowth can lead to oral disease.

Aims: To analyze new biological materials (papain, pectin, three plant extracts and their combinations), for prevention, control, and treatment of oral bacteria and biofilm in vitro and in vivo.

Methods: Papain, citric pectin, extracts of Carya illinoinensis, Quercus rubra, and Smilax glyciphylla were applied. In vitro test was performed by means of the spectrophotometric assay and CFU evaluation after treatments application. In vivo tests were performed to evaluate the number of microorganisms presented in dental biofilm: before and 1.5 h after brushing with different treatments; after 10 days of brushing with various treatments in 10 groups of patients, signing an informed consent approved by the Institutional Ethics Committee of the Autonomous University of Coahuila.

Results: In vitro, the plant extracts inhibited the growth of Streptococcus sp. as well as a mixture of microorganisms that form dental biofilms. Papain activity was inhibited by plant extracts. In vivo, brushing of teeth with selected plant extracts reduced the number of bacteria in the dental plaques.

Conclusions: The extracts of Quercus rubra, Carya illinoinensis and Smilax glyciphylla and papain (with or without pectin) had an inhibitory effect on the dental biofilm formation. In vitro test demonstrated the bacteriostatic effect of plant extracts or their mixture.

Keywords: Aqueous extract; Carya illinoinensis; oral microorganisms control; papain; pectin; Quercus rubra; Smilax glyciphylla.

Resumen

Contexto: La caries dental es una enfermedad infecciosa; destruye la estructura dentaria por bacterias formadoras de ácido existentes en la placa dental y la biopelícula intraoral, compuestos por comunidades de distintas especies microbianas, la reproducción descontrolada de dichos microorganismos puede causar diversas enfermedades en la cavidad oral.

Objetivos: Analizar nuevos materiales biológicos (papaína, pectina, tres extractos de plantas y sus combinaciones), para la prevención, control y tratamiento de las bacterias orales y biopelícula bacteriana in vitro e in vivo.

Métodos: Se aplicaron papaína, pectina cítrica, extractos de Carya illinoinensis, Quercus rubra, y Smilax glyciphylla. La prueba in vitro se realizó por espectrofotometría y CFU después de la aplicación de tratamientos. In vivo se evalúo número de microorganismos en la biopelicula; antes, 1.5 h después del cepillado y después de 10 días de cepillado con los diferentes tratamientos en 10 grupos de pacientes, firmando consentimiento aprobado por el Comité Institucional de ética de la Universidad Autónoma de Coahuila.

Resultados: In vitro, los extractos vegetales inhibieron el crecimiento de Streptococcus sp. así como la mezcla de microorganismos que forman la biopelícula bacteriana. La actividad de la papaína fue inhibida por extractos de plantas. In vivo, el cepillado de los dientes con extractos de plantas seleccionadas redujo el número de bacterias en la placa dental.

Conclusiones: Los extractos de Quercus rubra, Carya illinoinensis y Smilax glyciphylla y papaína (con y sin pectina) tuvieron efecto inhibitorio en la formación de la biopelícula dental. Las pruebas in vitro demostraron efecto bacteriostático de los extractos de plantas o sus mezclas.

Palabras Clave: Carya illinoinensis; control de microorganismos orales; extracto acuoso; papaína; pectina; Quercus rubra: Smilax glyciphylla.

 

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Citation Format: Elda P. Segura, Luis Méndez, Eréndira Márquez, Alejandra I. Vargas, Karla M. Gregorio, José L. Martínez, Anna Ilyina (2015) Effect of Carya illinoinensis, Quercus rubra and Smilax glyciphylla extracts, pectin, and papain on the dental biofilm microorganisms. J Pharm Pharmacogn Res 3(5): 118-129.
This article has been cyted by:
Vargas Segura AI, Ilyina A, Segura Ceniceros EP, Silva Belmares Y, Méndez González L (2015) Etiology and microbiology of periodontal diseases: A review. African Journal of Microbiology Research 9(48): 2300-2306. DOI: 10.5897/AJMR2015.7609

© 2015 Journal of Pharmacy & Pharmacognosy Research (JPPRes)

Phytochemistry and antibacterial activity of Crotalaria incana extracts

J Pharm Pharmacogn Res 3(4): 100-108, 2015.

Original Article | Artículo Original

Phytochemical analysis and antibacterial activity on seed and pod extracts of Crotalaria incana

[Análisis fitoquímico y actividad antibacteriana de extractos de semillas y vainas de Crotalaria incana]

Mathewos Anza Alemu1*, Habtamu Gelaw Mekonnen1*, Milkyas Endale Annisa2

1Department of Chemistry, College of Natural and Computational Sciences, Debre Tabor University, P. O. Box 272, Debre Tabor, Ethiopia.
2Department of Chemistry, College of Natural and Computational Sciences, Hawassa University, P. O. Box 05, Hawassa, Ethiopia.
Abstract

Context: Crotalaria incana L. (Fabaceae) is used for various traditional medicinal treatments such as astringent, jaundice and palpitation, inflammation, skin disease and purgative.

Aims: To investigate the phytochemical constituents and evaluate the antibacterial activity of seed and pod extracts of C. incana.

Methods: Phytochemical screening tests were conducted to identify the class of compounds present in the dichloromethane/methanol (1:1) extracts of seed and pod. Silica gel column chromatographic technique was applied to separate the constituents of the extracts. Various spectroscopic techniques (IR, NMR (1H, 13C and DEPT-135) were applied to determine the structures of isolated compounds. Antibacterial activities were evaluated via disc diffusion method.

Results: Preliminary phytochemical screening of seed and pod extracts of C. incana L. revealed the presence alkaloids, flavonoids, triterpenes, tannins and steroids and absence of anthraquinones. Silica gel column chromatography separation of the extract yielded a known steroid β-sitosterol (1) and 1-nonadecanol (2). Evaluation of antibacterial activity of crude extract via disc diffusion method against Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumonia and Salmonella typhi showed moderate susceptibility of this selected Gram-positive and Gram-negative bacteria strains, comparable to the activity of the antibiotic (gentamicin).

Conclusions: The compound (2) (1-nonadecanol) was isolated for the first time from the C. incana. These results proved that polar extracts of the seeds and pods of C. incana possess antibacterial activity.

Keywords: Antibacterial; Crotalaria; Fabaceae; 1-nonadecanol; steroid.

Resumen

Contexto: Crotalaria incana L. (Fabaceae) es usada en varios tratamien-tos medicinales tradicionales como astringente, ictericia y palpitaciones, inflamación, enfermedades de la piel y purgante.

Objetivos: Investigar los constituyentes fitoquímicos y evaluar la actividad antibacteriana de extractos de semillas y vainas de C. incana.

Métodos: Se llevaron a cabo pruebas de tamizaje fitoquímico para identificar la clase de compuestos presentes en extractos de semilla y vaina en diclorometano/metanol (1:1). La técnica cromatográfica en columna de gel de sílice se aplicó para separar los constituyentes de los extractos. Diversas técnicas espectroscópicas (IR, RMN (1H, 13C y DEPT-135) se aplicaron para determinar las estructuras de los compuestos aislados. Las actividades antibacterianas fueron evaluadas mediante el método de difusión en disco.

Resultados: El tamizaje fitoquímico preliminar de los extractos de semillas y vainas de C. incana L. reveló la presencia de alcaloides, flavonoides, triterpenos, taninos y esteroides y ausencia de antraquinonas. Mediante la separación por cromatografía en columna en gel de sílice del extracto se aisló un conocido esteroide β-sitosterol (1) y 1-nonadecanol (2). La evaluación de la actividad antibacteriana de extracto crudo mediante el método de difusión en disco frente a Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae y Salmonella typhi mostraron susceptibilidad moderada a estas cepas de bacterias Gram-positivas y Gram-negativas seleccionadas, comparable a la actividad del antibiótico (gentamicina).

Conclusiones: El compuesto (2) (1-nonadecanol) fue aislado por primera vez de C. incana. Estos resultados demostraron que los extractos polares de las semillas y las vainas de C. incana poseen actividad antibacteriana.

Palabras Clave: Antibacteriana; Crotalaria; esteroide; Fabaceae; 1-nonadecanol.

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Citation Format: Mathewos Anza Alemu, Habtamu Gelaw Mekonnen, Milkyas Endale Annisa (2015) Phytochemical analysis and antibacterial activity on seed and pod extracts ofCrotalaria incana. J Pharm Pharmacogn Res 3(4): 100-108.

© 2015 Journal of Pharmacy & Pharmacognosy Research (JPPRes)

Evaluation of microbial and physico-chemical qualities of cough syrups

J Pharm Pharmacogn Res 3(4): 92-99, 2015.

Original Article | Artículo Original

Evaluation of microbial and physico-chemical qualities of some cough syrups marketed in Sana’a city, Yemen

[Evaluación de la calidad físico-química y microbiológica de jarabes para la tos comercializados en la ciudad de Sana’a, Yemen]

Ali G. Al−Kaf1*, Saeed M. Alghalibi2, Wadhah H. Edrees2

1Medicinal Chemistry Department, Faculty of Pharmacy; 2Biology Department, Faculty of Science, Sana’a University, Sana’a, Yemen.*E-mail: alialkaf21@gmail.com
Abstract

Context: Microbial contamination of cough syrups can bring clinical hazards to the users or patients as well as physical and chemical changes in the product.

Aims: To evaluate the microbial and physicochemical characteristics of two hundred samples of four different types of cough syrups marketed in Sana’a city, Yemen.

Methods: All collected samples were subjected to the following examinations: the total microbial count, type of isolated microorganisms, physical parameters, and concentration of active ingredients were identified and assessed by standard techniques described in US Pharmacopeia.

Results: All the cough syrup samples used contained viable microbial load within acceptable limit according Pharmacopeia specifications. Bacillus subtilis, Micrococcus fulvum, and Staphylococcus epidermidis were the most commonly recovered bacteria. However, Aspergillus niger, Aspergillus fumigatus, Penicillium notatum, Mucor sp., and Aspergillus flavus were the most fungi isolated. The physical properties represented in the appearance, density, and pH of the analyzed samples complied with Pharmacopoeia standards. The concentrations of diphenhydramine HCl (92,51 – 108,78%), pseudoephedrine HCl (94,55 – 109,07%), and triprolidine HCl (98,20 – 104,19%) were recorded.

Conclusions: All cough syrups marketed in Sana’a City had good microbiological and physico-chemical qualities.

Keywords: Diphenhydramine; microbiological assay, physical assay, pseudoephedrine; triprolidine.

Resumen

Contexto: La contaminación microbiana de los jarabes para la tos puede traer riesgos clínicos a los usuarios o pacientes, así como los cambios físicos y químicos en el producto.

Objetivos: Evaluar las características microbianas y físico-químicas de doscientas muestras de cuatro tipos diferentes de jarabes para la tos que se comercializan en la ciudad de Sana’a, Yemen.

Métodos: Todas las muestras recogidas se sometieron a los siguientes exámenes: recuento microbiano total, tipo de microorganismos aislado, parámetros físicos, y la concentración de ingredientes activos fue identificada y evaluada por técnicas estándares descritas en la Farmacopea de EE.UU.

Resultados: Todas las muestras de jarabe para la tos contenían carga microbiana viable, dentro de límites aceptables según las especificaciones de la Farmacopea. Bacillus subtilis, Micrococcus fulvum y Staphylococcus epidermidis fueron las bacterias más comúnmente identificadas. Sin embargo, Aspergillus niger, Aspergillus fumigatus, Penicillium notatum, Mucor sp., Aspergillus flavus fueron los hongos aislados. Las propiedades físicas, representadas en la apariencia, densidad, y el pH de las muestras cumplieron con los estándares de la Farmacopea. Se registraron las concentraciones difenhidramina HCl (92,51 – 108,78%), pseudoefedrina HCl (94,55 – 109,07%), y de triprolidina HCl (98,20 – 104,19%).

Conclusiones: Todos los jarabes para la tos comercializados en la ciudad de Sana’a tuvieron buenas cualidades microbiológicas y físico-químicas.

Palabras Clave: Difenhidramina; ensayo físico; ensayo microbiológico; pseudoefedrina; triprolidina.

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Citation Format: Ali G. Al−Kaf, Saeed M. Alghalibi, Wadhah H. Edrees (2015) Evaluation of microbial and physico-chemical qualities of some cough syrups marketed in Sana’a city, Yemen. J Pharm Pharmacogn Res 3(4): 92-99.

© 2015 Journal of Pharmacy & Pharmacognosy Research (JPPRes)

In vitro antimycobacterial activity of G. glabra

J Pharm Pharmacogn Res 3(4): 80-86, 2015.

Original Article | Artículo Original

In vitro antimycobacterial activity of acetone extract of Glycyrrhiza glabra

[Actividad antimicobacteriana in vitro del extracto de acetona de Glycyrrhiza glabra]

Swapna S. Nair1, Rajesh R. Pharande2, Anilkumar S. Bannalikar2, Alka P. Mukne1

1Department of Pharmacognosy & Phytochemistry, Bombay College of Pharmacy, Kalina, Santacruz (East), Mumbai- 400 098, India.
2Department of Microbiology, Bombay Veterinary College, Parel, Mumbai- 400 012. India.*E-mail: alka.mukne@gmail.com
Abstract

Context: Glycyrrhiza glabra (licorice) has been used since ages as expectorant, antitussive and demulcent. G. glabra has been indicated in Ayurveda as an antimicrobial agent for the treatment of respiratory infections and tuberculosis.

Aims: To evaluate the antimycobacterial activity of acetone extract of G. glabra by in vitro techniques.

Methods: The anti-tubercular activity of acetone extract of G. glabra, obtained by Soxhlet extraction, was evaluated against Mycobacterium tuberculosis H37Rv (ATCC 27294). The in vitro anti-tubercular activity was determined by Resazurin Microtiter Plate Assay (REMA) and colony count method. Further, the anti-tubercular activity of acetone extract of G. glabra was determined in human macrophage U937 cell lines and was compared against that of the standard drugs isoniazid, rifampicin and ethambutol.

Results: G. glabra extract showed significant activity against Mycobacterium tuberculosis, when evaluated by REMA/colony count methods and in U937 human macrophage cell lines infected with Mycobacterium tuberculosis H37Rv. The activity of the extract was comparable to those of standard drugs. It was observed that the extract showed time and concentration dependent antimycobacterial activity.

Conclusions: The present study reveals that G. glabra extract has promising anti-tubercular activity by preliminary in vitro techniques and in U937 macrophage cell line. Therefore, it has the definite potential to be developed as an affordable, cost-effective drug against tuberculosis.

Keywords: Infections; licorice; macrophage; Mycobacterium tuberculosis H37Rv.

Resumen

Contexto: La especie Glycyrrhiza glabra (regaliz) ha sido usada desde la antigüedad como expectorante, antitusiva, y demulcente. G. glabra ha sido indicada en la medicina ayurvédica como un agente antimicrobiano para el tratamiento de infecciones respiratorias y tuberculosis.

Objetivos: Evaluar la actividad antimicobacteriana del extracto de acetona de G. glabra por técnicas in vitro.

Métodos: La actividad anti-tuberculosa del extracto de acetona de G. glabra, obtenido por Soxhlet, fue evaluada contra Mycobacterium tuberculosis H37Rv (ATCC 27294). La actividad anti-tuberculosa in vitro fue determinada por Ensayo de Placa de Microtitulación Resazurin (REMA) y el método de conteo de colonias. Además, la actividad anti-tuberculosa de este extracto fue determinada en células de macrófagos humanos U937 y fue comparada contra aquella de fármacos de referencia como isoniacida, rifampicina y etambutol.

Resultados: El extracto de G. glabra mostró una actividad significativa contra Mycobacterium tuberculosis cuando fue evaluado por los métodos REMA/conteo de colonias y en macrófagos U937 infectados con M. tuberculosis. La actividad del extracto fue comparable a aquella observada con los fármacos de referencia. El extracto mostró una actividad antimicobacteriana dependiente de la concentración y el tiempo.

Conclusiones: El presente estudio revela que el extracto en acetona de G. glabra tiene actividad anti-tuberculosa prometedora, demostrada por técnicas preliminares in vitro y en la línea de macrófagos U937. De esta manera, esta especie tiene un potencial definido para desarrollar un producto asequible contra la tuberculosis.

Palabras Clave: Infectiones; regaliz; macrófago; Mycobacterium tuberculosis H37Rv.

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Citation Format: Nair SS, Pharande RR, Bannalikar AS, Mukne AP (2015) In vitro antimycobacterial activity of acetone extract of Glycyrrhiza glabra. J Pharm Pharmacogn Res 3(4): 80-86.
This article has been cited by:
Viswanathan V, Pharande R, Bannalikar A, Gupta P, Gupta U, Mukne A (2018) Inhalable liposomes of Glycyrrhiza glabra extract for use in tuberculosis: formulation, in vitro characterization, in vivo lung deposition, and in vivo pharmacodynamic studies. Drug Development and Industrial Pharmacy. DOI: 10.1080/03639045.2018.1513025
Sasikumar K, Ranjan Ghosh A, Dusthackeer A (2018) Antimycobacterial potentials of quercetin and rutin against Mycobacterium tuberculosis H37Rv. 3 Biotech 8:427. DOI: 10.1007/s13205-018-1450-5
Viswanathan V, Mehta H, Pharande R, Bannalikar A, Gupta P, Gupta U, Mukne A (2018) Mannosylated gelatin nanoparticles of licorice for use in tuberculosis: Formulation, in vitro evaluation, in vitro cell uptake, in vivo pharmacokinetics and in vivo anti-tubercular efficacy. Journal of Drug Delivery Science and Technology 45: 255-263. DOI: 10.1016/j.jddst.2018.01.017
Kahaliw W, Aseffa AAbebe MTeferi M, Engidawork E (2017) Evaluation of the antimycobacterial activity of crude extracts and solvent fractions of selected Ethiopian medicinal plants. BMC Complementary and Alternative Medicine 17: 143. DOI: 10.1186/s12906-017-1563-0
Jadhav SG, Viswanathan V, Mukne AP (2016) Validated HPTLC method for simultaneous quantification of isoniazid, rifampicin and glabridin. J Pharm Biomed Sci 6(7): 453–459. DOI: 10.20936/jpbms/160270
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Wubayehu Kahaliw (2016) Activity testing, toxicity assay and characterization of chemical constituents of medicinal plants used to treat tuberculosis in Ethiopian Traditional Medicine. A Thesis Submitted to the School of Graduate Studies of Addis Ababa University in Partial Fulfillment of the Requirements for the Degree of Doctor of Philosophy in Pharmacology. Website

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Microbial and physicochemical assays of paracetamol in analgesic syrups

J Pharm Pharmacogn Res 3(1): 6-12, 2015.

Original Article | Artículo Original

Microbial and physicochemical assays of paracetamol in different brands of analgesic syrups sold in Sana’a City-Yemen

[Ensayos microbiológicos y físico-químicos de paracetamol en diferentes marcas de jarabes analgésicos vendidos en la ciudad de Sana’a, Yemen]

Ali G. Al−Kaf1*, Saeed M. Alghalibi2, Wadhah H. Edrees2

1Medicinal Chemistry Department, Faculty of Pharmacy; 2Biology Department, Faculty of Science, Sana’a University, Sana’a, Yemen.
*E-mail: alialkaf21@gmail.com
Abstract

Context: Contamination of pharmaceuticals with microorganisms irrespective whether they are harmful or nonpathogenic can bring about changes in physicochemical characteristics of the drugs.

Aims: To assay the microbial and physicochemical characteristics of paracetamol of two hundreds samples of different brands of analgesic syrups sold in Sana’a City, Yemen.

Methods: Total viable aerobic count, type of isolated microorganisms, physical properties, and content of active ingredients were identified and evaluated by standard methods and techniques. The SPSS program was used to statistical analysis of variance for results obtained.

Results: The total bacterial count of <10 CFU/mL and <100 CFU/mL in 179 (89.5%) and 21 (10.5%) samples, respectively was recorded, while the total fungal count was ≤10 CFU/mL in all analyzed syrup samples. The isolated bacteria were Bacillus subtilis, Micrococcus fulvum, and Staphylococcus epidermidis while isolated fungi were Aspergillus niger, Aspergillus fumigatus, and Penicillium notatum. Bacillus subtilis and Aspergillus niger were the predominant bacteria and fungi isolated. The color results had a light red liquid with a sweet taste in the analyzed analgesic syrups. The pH values were ranged from 4.44–5.88. However, the density fluctuated from 1.149–1.184 g/mL. The paracetamol concentration as an active ingredient in the analgesic syrup was recorded from 98.19% – 106.53%.

Conclusions: This finding showed that all analgesic syrups sold in Sana’a City followed Pharmacopeia specifications on microbial and physicochemical qualities.

Keywords: Content; evaluation; microbiological; physical; oral liquid.

Resumen

Contexto: La contaminación de los productos farmacéuticos con microorganismos, independientemente si son perjudiciales o no puede provocar cambios en las características físico-químicas de los fármacos.

Objetivos: Analizar las características microbianas y físico-químicas del paracetamol de doscientas muestras de diferentes marcas de jarabes analgésicos vendidos en la ciudad de Sana’a, Yemen.

Métodos: Fueron medidos el recuento total viable aeróbico, el tipo de microorganismos aislados, las propiedades físicas y el contenido de ingredientes activos mediante métodos y técnicas estándares. El programa SPSS se utilizó para el análisis estadístico de la varianza de los resultados.

Resultados: Fue registrado el conteo total de bacterias de <10 CFU/mL y <100 CFU/mL en 179 (89.5%) y 21 (10.5%) muestras, respectivamente, mientras que el conteo total de hongos fue ≤10 CFU/mL en todas las muestras de jarabe analizadas. Las bacterias aisladas fueron Bacillus subtilis, Micrococcus fulvum y Staphylococcus epidermidis, mientras que los hongos aislados fueron Aspergillus niger, Aspergillus fumigatus y Penicillium notatum. Bacilus subtilis y Aspergillus niger fueron los microorganismos aislados predominantes. Los jarabes analgésicos tuvieron una apariencia líquida de color rojo claro con un sabor dulce. Los valores de pH estuvieron en el rango de 4,44 – 5,88. La densidad varió de 1,149 – 1,184 g/mL. La concentración de paracetamol, como un ingrediente activo dentro del jarabe analgésico, fue registrada desde 98,19 – 106,53%.

Conclusiones: Este hallazgo mostró que todos los jarabes analgésicos, vendidos en la ciudad de Sana’a, siguieron las especificaciones de calidad microbianas y físico-químicas de la farmacopea.

Palabras Clave: Contenido; evaluación; microbiológica; física; oral líquida.

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Citation Format: Al−Kaf AG, Alghalibi SM, Edrees WH (2015) Microbial and physicochemical assays of paracetamol in different brands of analgesic syrups sold in Sana’a City-Yemen. J Pharm Pharmacogn Res 3(1): 6-12.
This article has been cited by:
Olaitan and OM, Morufat BM (2018) Assessment of microbiological quality of syrup and water used in pharmaceutical industries in Kano State, Nigeria.  Ife Journal of Science 20 (1): 119-126. DOI: 10.4314/ijs.v20i1.12

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CO 012: PANUSIN, A NEW DEFENSIN-LIKE ANTIMICROBIAL PEPTIDE FROM THE HEMOCYTES OF SPINY LOBSTER Panulirus argus

J Pharm Pharmacogn Res 2(Suppl. 1): S7, 2014

Special supplement with the abstract book of LATINFARMA 2013

Oral Communication

CO 012: PANUSIN, A NEW DEFENSIN-LIKE ANTIMICROBIAL PEPTIDE FROM THE HEMOCYTES OF SPINY LOBSTER Panulirus argus

Pacios-Michelena A1, Montero-Alejo V1, Perdomo-Morales R1, Corzo G2, Pardo-Ruiz Z1, Vega-Hurtado Y1

1Center for Pharmaceuticals Research and Development, Ave. 26 No. 1605, Nuevo Vedado, CP 10600, Havana, Cuba; Telephone number: 881-1944. E-mail: anabel.pacios@cidem.sld.cu
2Institute of Biotechnology, UNAM, Av. Universidad 2001, Cuernavaca, Morelos 62210, Mexico.
Abstract

Introduction: Naturally occurring antimicrobial peptides are component of first line of host defense against pathogens as part of the humoral innate immune response in crustacean. Marine invertebrates lack an acquired immune system, and must rely mainly on innate immunity mechanisms encompassed by cellular and humoral responses. In the spiny lobsters Panulirus argus, there are yet any reports concerning the isolation and characterization of these biomolecules from hemolymph.

Material and methods: Hemocytes were analyzed after in vivo challenged of juvenile lobsters with LPS. The TFA acid precipitation was used as fractionation procedure and the acid lysate extract showing antimicrobial activity was further purified by cation exchange chromatography. Purity was evaluated using RP-HPLC and TricineUrea-PAGE electrophoresis. The minimal inhibitory concentration (MIC) was evaluated by broth microdilution assay against Gram positive and Gram negative microorganisms, while the susceptibility assay was assessed by radial diffusion. Complete amino acid sequence was established by a combination of Edman degradation, mass spectrometry and transcriptome analysis.

Results: the sequence analysis demonstrated for the first time a defensin-like antimicrobial peptide isolated from crustacean. This defensin shows potent antimicrobial activity against gram-positive and gram-negative bacteria, it is not haemolytic or LPS-binding activity. Besides, it enhances LPS-induced pro-inflammatory cytokines IL-6, IL1β and TNFα as shows in the Monocyte Activation Test (MAT).

Conclusion: A defensin-like antimicrobial peptide was identified with potent antimicrobial activity.