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The Journal of Pharmacy & Pharmacognosy Research (JPPRes) is an international, specialized and peer-reviewed open access journal, which publishes studies in the pharmaceutical and herbal fields concerned with the physical, botanical, chemical, biological, toxicological properties and clinical applications of molecular entities, active pharmaceutical ingredients, devices and delivery systems for drugs, vaccines and biologicals, including their design, manufacture, evaluation and marketing. This journal publishes research papers, reviews, commentaries and letters to the editor as well as special issues and review of pre-and post-graduate thesis from pharmacists or professionals involved in Pharmaceutical Sciences or Pharmacognosy.

Pharmacognosy of Luisia tenuifolia



J Pharm Pharmacogn Res 10(1): 113-127, 2022.

Original Article

Pharmacognostical standardisation of an epiphytic orchid, Luisia tenuifolia Blume

[Estandarización farmacognóstica de una orquídea epífita, Luisia tenuifolia Blume]

Sakthi P. Sethuraman, Kumar P. Ramachandran*

Department of Pharmacognosy, SRM College of Pharmacy, Faculty of Medicine and Health Sciences, SRM Institute of Science & Technology, SRM Nagar, Kattankulathur, 603203, Kanchipuram, Chennai TN, India.

*E-mail: kumarp1@srmist.edu.in

Abstract

Context: Pharmacognostical standardization of crude drugs is essential before carrying out its scientific validation as it furnishes the identity and authenticity of the plant. Luisia tenuifolia Blume also known as ‘slender leaved Luisia’, has been found to be traditionally practised in treating cuts, boils, wounds and abscesses.

Aims: To perform the pharmacognostical investigation of L. tenuifolia and thereby reporting the morpho-anatomical, histochemical and physico-chemical characteristics of the epiphyte.

Methods: Anatomical characteristic features were observed from the transverse sections of the plant specimens while staining of the transverse sections by using suitable chemical reagents was performed for the histochemical analysis. Moreover, the powder microscopy, physicochemical parameters and fluorescence analysis were also carried out on the pulverised whole plants of L. tenuifolia.

Results: The morphological and anatomical characteristics revealed in the study will remain as valuable diagnostic features in the botanical authentication of this orchid. The powder microscopical characters revealed the presence of epidermal fragments and paracytic stomata, fibres, vessel elements and sclereids. The histochemical profile of different parts of the epiphyte showed the localisation of tannins, starch, lipids, lignin, mucilage, protein, cutin and calcium oxalate crystals in the tissue system. The physico-chemical parameters and fluorescence observations determined the pharmacopoieal standards of the plant in powdered form.

Conclusions: Thus, the study records the morpho-anatomical, histochemical and physicochemical standards of the whole plants of L. tenuifolia in order to achieve pharmacognostical standardization of this epiphytic orchid. Further, phytochemical standardization and pharmacological validation are under pipeline owing towards an effective phyto-pharmacological research.

Keywords: histochemistry; Luisia tenuifolia; physicochemical constants; powder microscopy; Orchidaceae; whole plant.

Resumen

Contexto: La estandarización farmacognóstica de los medicamentos crudos es fundamental antes de llevar a cabo su validación científica, ya que proporciona la identidad y autenticidad de la planta. Se ha descubierto que la Luisia tenuifolia Blume, también conocida como “Luisia de hojas delgadas”, se practica tradicionalmente en el tratamiento de cortes, forúnculos, heridas y abscesos.

Objetivos: Realizar la investigación farmacognóstica de L. tenuifolia y así informar las características morfoanatómicas, histoquímicas y fisicoquímicas de la epífita.

Métodos: Se observaron rasgos anatómicos característicos de las secciones transversales de los especímenes de plantas mientras se realizaba la tinción de las secciones transversales mediante el uso de reactivos químicos adecuados para el análisis histoquímico. Además, la microscopía de polvo, los parámetros fisicoquímicos y el análisis de fluorescencia también se llevaron a cabo en las plantas enteras pulverizadas de L. tenuifolia.

Resultados: Las características morfológicas y anatómicas reveladas en el estudio permanecerán como características diagnósticas valiosas en la autenticación botánica de esta orquídea. Los caracteres microscópicos de polvo revelaron la presencia de fragmentos epidérmicos y estomas paracíticos, fibras, elementos vasculares y esclereidas. El perfil histoquímico de diferentes partes de la epífita mostró la localización de taninos, almidón, lípidos, lignina, mucílagos, proteínas, cutina y cristales de oxalato de calcio en el sistema tisular. Los parámetros físico-químicos y las observaciones de fluorescencia determinaron los estándares farmacopeicos de la planta en forma de polvo.

Conclusiones: De esta manera, el estudio registra los estándares morfoanatómicos, histoquímicos y fisicoquímicos de todas las plantas de L. tenuifolia para lograr la estandarización farmacognóstica de esta orquídea epífita. Además, la estandarización fitoquímica y la validación farmacológica están en proceso debido a una investigación fito-farmacológica eficaz.

Palabras Clave: constantes fisicoquímicas; histoquímica; Luisia tenuifolia; microscopía de polvo; Orchidaceae; toda la planta.

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Citation Format: Sakthi PS, Kumar PR (2022) Pharmacognostical standardisation of an epiphytic orchid, Luisia tenuifolia Blume. J Pharm Pharmacogn Res 10(1): 113–127.

© 2022 Journal of Pharmacy & Pharmacognosy Research (JPPRes)

Prescribing errors in the emergency department



J Pharm Pharmacogn Res 10(1): 104-112, 2022.

Original Article

Antibiotic prescribing errors generated by the use of an electronic prescribing system in the emergency department: A mixed-method study

[Errores de prescripción de antibióticos generados por el uso de un sistema de prescripción electrónica en el servicio de urgencias: un estudio de método mixto]

Ahmad Z. Al Meslamani1, Derar H. Abdel-Qader2, Noura Ziad3, Nadia Al Mazrouei4, Asma A. El-Shara5, Husam El Sharu6, Eman Merghani Ali7 , Rand Haider Al Zahawi8, Samah Bahy Mohammed Ebaed9, Osama Mohamed Ibrahim4,10

1College of Pharmacy, Al Ain University of Science and Technology, Abu Dhabi, United Arab Emirates.

2Faculty of Pharmacy and Medical Sciences, University of Petra, Amman, Jordan.

3Allied Medical Sciences, Zarqa University, Zarqa, Jordan.

4Department of Pharmacy Practice and Pharmacotherapeutics, College of Pharmacy, University of Sharjah, United Arab Emirates.

5Faculty of Pharmacy, Philadelphia University, Amman, Jordan.

6Indiana University Center for Health Innovation and Implementation Science, Indianapolis, Indiana, USA.

7College of Pharmacy, Jazan University, Jazan, Saudi Arabia.

8Dubai Pharmacy College for Girls, Dubai, United Arab Emirates.

9Clinical Pharmacology Department, Benha Faculty of Medicine, Benha University, Benha, Egypt.

10Department of Clinical Pharmacy, Faculty of Pharmacy, Cairo University, Egypt.

*E-mail: amaslamanie1095@gmail.com, ahmad.almeslamani@aau.ac.ae

Abstract

Context: Inappropriate prescribing of antibiotics can result in serious patient harm.

Aims: To investigate the incidence, nature, clinical severity, and causes of antibiotic prescribing errors (APEs) in the emergency department (ED) of a large hospital in Jordan.

Methods: A mixed-method approach was used to explore the incidence and types of APEs by direct observation of electronic prescriptions (EPS) of antibiotics over four weeks, and to identify causes of errors by semi-structured interviews with ED physicians. The clinical severity of APEs was rated by a committee of experts. SPSS V26 and NVivo 10 were used for the analysis of quantitative and qualitative data, respectively.

Results: The incidence of APEs caused by the use of EPS was 4.3%. Wrong quantity (32.62%), wrong dose (15.25%), and duplicate drugs (13.55%) were identified as the most common types of APEs. More than one-third of APEs identified were deemed clinically significant, seven were serious, and one was lethal. Minor and significant antibiotic APEs across physicians who attended workshops on EPS and those who did not were 75.00% versus 46.77% (p = 0.001) and 18.75% versus 52.41% (p = 0.013), respectively. Three major causes of errors were identified: 1) System-related (system crash, drop-down menu), 2) user-related (lack of computer skills), and 3) workplace-related (overcrowding, inadequate staffing).

Conclusions: APEs generated by the use of EPS were common in EDs in Jordan, clinically significant, and multifactorial. Further research is required to cover pharmacists’ perspectives of this kind of errors.

Keywords: antibiotics; emergency departments; prescribing errors.

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Resumen

Contexto: La prescripción inadecuada de antibióticos puede provocar daños graves al paciente.

Objetivos: Investigar la incidencia, naturaleza, gravedad clínica y causas de los errores en la prescripción de antibióticos (APE) en el departamento de emergencias (DE) de un gran hospital en Jordania.

Métodos: Se utilizó un enfoque de método mixto para explorar la incidencia y los tipos de APE mediante la observación directa de prescripciones electrónicas de antibióticos (EPS) durante cuatro semanas, y para identificar las causas de los errores mediante entrevistas semiestructuradas con los médicos del servicio de urgencias. Un comité de expertos calificó la gravedad clínica de los APE.

Resultados: La incidencia de APE causada por el uso de EPS fue del 4,3%. La cantidad incorrecta (32,62%), la dosis incorrecta (15,25%) y los fármacos duplicados (13,55%) se identificaron como los tipos más comunes de APE. Más de un tercio de los APE identificados se consideraron clínicamente significativos, siete fueron graves y uno fue letal. Los APE antibióticos menores y significativos entre los médicos que asistieron a talleres sobre EPS y los que no asistieron fueron 75,00% versus 46,77% (p = 0,001) y 18,75% versus 52,41% (p = 0,013), respectivamente. Se identificaron tres causas principales de errores: 1) relacionadas con el sistema (caída del sistema, menú desplegable), 2) relacionadas con el usuario (falta de conocimientos informáticos) y 3) relacionadas con el lugar de trabajo (hacinamiento, personal inadecuado).

Conclusiones: Los APE generados por el uso de EPS fueron comunes en los DE en Jordania, clínicamente significativos y multifactoriales. Se requiere más investigación para cubrir las perspectivas de los farmacéuticos sobre este tipo de errores.

Palabras Clave: antibióticos; departamentos de emergencia; prescribir errores.

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Citation Format: Al Meslamani AZ, Abdel-Qader DH, Ziad N, Al Mazrouei N, El-Shara AA, El Sharu H, Merghani Ali EM, Al Zahawi RH, Ebaed SBM, Ibrahim OM (2022) Antibiotic prescribing errors generated by the use of an electronic prescribing system in the emergency department: A mixed-method study. J Pharm Pharmacogn Res 10(1): 104–112.

© 2022 Journal of Pharmacy & Pharmacognosy Research (JPPRes)

Ammodaucus leucotrichus antihyperglycemic activity



J Pharm Pharmacogn Res 10(1): 94-103, 2022.

Original Article

Ammodaucus leucotrichus Coss. & Durieu: Antihyperglycemic activity via the inhibition of α-amylase, α-glucosidase, and intestinal glucose absorption activities and its chemical composition

[Ammodaucus leucotrichus Coss. & Durieu: Actividad antihiperglucémica por inhibición de α-amilasa, α-glucosidasa, y las actividades de absorción de glucosa intestinal y su composición química]

Saliha Bouknana, Nour Elhouda Daoudi, Mohamed Bouhrim, Abderrahim Ziyyat, Abdelkhaleq Legssyer, Hassane Mekhfi, Mohamed Bnouham*

Laboratory of Bioresources, Biotechnologies, Ethnopharmacology, and Health, Faculty of Sciences, Mohamed the First University, Boulevard Mohamed VI; BP: 717; 60000, Oujda, Morocco.

*E-mail: a.bnouham@ump.ac.ma, mbnouham@yahoo.fr

Abstract

Context: Ammodaucus leucotrichus commonly known as a ‘Kamune es sufi or akâman’ in Morocco, is used to treat many diseases including diabetes.

Aims: To investigate the antihyperglycemic activity of an aqueous extract of fruits A. leucotrichus (AEAL) and its chemical composition.

Methods: The antihyperglycemic effect of the AEAL was tested against intestinal α-glucosidase and pancreatic α-amylase activities, in vitro, at the concentrations (41-328 µg/mL) and (0.5-3 mg/mL) respectively. In addition, the inhibitory effect of the AEAL (150 mg/kg) against these enzymes was confirmed, in vivo in normal and alloxan diabetic rats using sucrose, starch, and glucose as a substrate.The antihyperglycemic effect of the AEAL was also tested against intestinal D-glucose absorption activity at the dose of 150 mg/kg using the jejunum segment perfusion technique, in situ. Chemical composition was evaluated using HPLC.

Results: The results of this study showed that the AEAL was significantly (p<0.001) inhibited the intestinal α-glucosidase, in vitro (IC50 = 0.254 mg/mL). The same effect of this extract was confirmed against the pancreatic α-amylase activity, with IC50 = 1.81 mg/mL. In vivo, the oral intake of the AEAL at a dose of 150 mg/kg was significantly attenuated the hyperglycemia induced by the sucrose, starch, and glucose in the normal and alloxan diabetic rats. AEAL, also, significantly (p<0.01) decreased intestinal glucose absorption, in situ.HPLC results revealed the presence of four molecules: vanillin, quercetin, kaempferol, and thymol.

Conclusions: A. leucotrichus showed a significant antihyperglycemic activity. This effect can be explained by the inhibition of α-amylase, α-glucosidase activities, and the intestinal absorption of D-glucose.

Keywords: alloxan; α-glucosidase; α-amylase;Ammodaucus leucotrichus; anti-hyperglycemic: intestinal glucose absorption.

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Resumen

Contexto: Ammodaucus leucotrichus comúnmente conocido como un ‘Kamune es sufi o akâma’ en Marruecos, se utiliza para tratar muchas enfermedades, incluida la diabetes.

Objetivos: Investigar la actividad antihiperglicémica de un extracto acuoso de frutos A. leucotrichus (AEAL) y su composición química.

Métodos: Se probó el efecto antihiperglucémico del AEAL contra las actividades de α-glucosidasa intestinal y α-amilasa pancreática, in vitro, en las concentraciones (41-328 µg/mL) y (0,5-3 mg/mL) respectivamente. Además, el efecto inhibidor del AEAL (150 mg/kg) contra estas enzimas, in vivo en ratas diabéticas normales y aloxan utilizando como sustrato sacarosa, almidón y glucosa. El efecto antihiperglucémico del AEAL también se probó contra la actividad de absorción de D-glucosa intestinal a la dosis de 150 mg/kg utilizando la técnica de perfusión del segmento de yeyuno in situ. La composición química se evaluó mediante HPLC.

Resultados: Los resultados de este estudio mostraron que el AEAL fue inhibido significativamente (p<0,001) la α-glucosidasa intestinal, in vitro (IC50 = 0,254 mg/mL). El mismo efecto de estos extractos se confirmó contra la actividad pancreática de la α-amilasa, con IC50 = 1,81 mg/mL. In vivo, la ingesta oral del AEAL a dosis de 150 mg/kg atenuó significativamente la hiperglucemia inducida por la sacarosa, el almidón y la glucosa en ratas diabéticas normales y aloxan. AEAL también disminuyó (p<0,01) la absorción de glucosa intestinal, in situ. Los resultados de HPLC revelaron la presencia de cuatro moléculas: vainillina, quercetina, kaempferol y timol.

Conclusiones: A. leucotrichus mostró una actividad antihiperglucémica significativa. Este efecto puede explicarse por la inhibición de las actividades de α-amilasa, α-glucosidasa, y la absorción intestinal de D-glucosa.

Palabras Clave: aloxano; α-glucosidasa; α-amilasa; Ammodaucus leucotrichus; antihiperglucémico; absorción glucosa intestinal.

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Citation Format: Bouknana S, Daoudi NE, Bouhrim M, Ziyyat A, Legssyer A, Mekhfi H, Bnouham M (2022) Ammodaucus leucotrichus Coss. & Durieu: Antihyperglycemic activity via the inhibition of α-amylase, α-glucosidase, and intestinal glucose absorption activities and its chemical composition. J Pharm Pharmacogn Res 10(1): 94–103.

© 2022 Journal of Pharmacy & Pharmacognosy Research (JPPRes)

Insulin use in treatment for diabetes inpatients



J Pharm Pharmacogn Res 10(1): 84-93, 2022.

Original Article

The use of insulin in treatment for inpatients with diabetes in Can Tho, Vietnam 2017 to 2020

[El uso de insulina en el tratamiento de pacientes hospitalizados con diabetes en Can Tho, Vietnam, 2017 a 2020]

Duyen Thi My Huynh1*, Duyen Quang Loc Vo1, Van De Tran2*

1Pharmaceutical Industry-Pharmaceutics, Can Tho University of Medicine and Pharmacy, 179 Nguyen Van Cu, Can Tho, Vietnam.

2Department of Drug Administration, Can Tho University of Medicine and Pharmacy, 179 Nguyen Van Cu, Can Tho, Vietnam.

*E-mail: tvde@ctump.edu.vn

Abstract

Context: Diabetes is a dangerous chronic disease with a rapidly increasing rate of hospitalization and death. Patients with uncontrolled diabetes are prone to dangerous acute and chronic complications.

Aims: To determine the characteristics of insulin use and factors related to blood glucose control in inpatients with diabetes at the Department of General Medicine-Can Tho University of Medicine and Pharmacy Hospital.

Methods: A cross-sectional descriptive study on 390 medical records of inpatients with diabetes at the Department of General Medicine-Can Tho University of Medicine and Pharmacy Hospital from 2017 to 2020.

Results: Most hospitalized patients had poor control of HbA1c (52.3%). During the treatment, patients were regularly tested for blood sugar and 3.8% of them had hypoglycemic test patterns. The rate of good control of fasting blood glucose at hospital discharge accounted for the majority with 67.4%. Regarding the insulin use, premixed insulin was used the most with a rate of 77.5% and insulin monotherapy accounted for 73.3%. The mean insulin dose was 23.4 ± 10.6 UI/day. Factors such as HbA1c index, comorbidities, and insulin doses were associated with poor glycemic control of inpatients.

Conclusions: The selection of insulin use in inpatients with diabetes was consistent with global guidelines and actual situations at the hospital. It is necessary to monitor factors such as HbA1c index, comorbidities, and insulin doses because these factors are associated with poor glycemic control of inpatients.

Keywords: associated factors; diabetes; glycemic control; insulin regimen.

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Resumen

Contexto: La diabetes es una enfermedad crónica peligrosa con una tasa de hospitalización y muerte que aumenta rápidamente. Los pacientes con diabetes no controlada son propensos a complicaciones crónicas y agudas peligrosas.

Objetivos: Determinar las características del uso de insulina y los factores relacionados con el control de la glucemia en pacientes con diabetes ingresados ​​en el Departamento de Medicina General-Hospital Universitario de Medicina y Farmacia de Can Tho.

Métodos: Estudio descriptivo transversal sobre 390 historias clínicas de pacientes hospitalizados con diabetes en el Departamento de Medicina General-Hospital Universitario de Medicina y Farmacia de Can Tho de 2017 a 2020.

Resultados: La mayoría de los pacientes hospitalizados presentaban un mal control de la HbA1c (52,3%). Durante el tratamiento, los pacientes se sometieron a pruebas periódicas de glucemia y el 3,8% de ellos presentaba patrones de prueba hipoglucémicos. La tasa de buen control de la glucemia en ayunas al alta hospitalaria representó la mayoría con 67,4%. En cuanto al uso de insulina, la insulina premezclada fue la más utilizada con una tasa del 77,5% y la monoterapia con insulina representó el 73,3%. La dosis media de insulina fue de 23,4 ± 10,6 UI/día. Factores como el índice de HbA1c, las comorbilidades y las dosis de insulina se asociaron con un control glucémico deficiente de los pacientes hospitalizados.

Conclusiones: La selección del uso de insulina en pacientes hospitalizados con diabetes fue consistente con las pautas globales y situaciones reales en el hospital. Es necesario monitorear factores como el índice de HbA1c, las comorbilidades y las dosis de insulina porque estos factores están asociados con un control glucémico deficiente de los pacientes hospitalizados.

Palabras Clave: control glicémico; diabetes; factores asociados; régimen de insulina.

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Citation Format: Huynh DTM, Vo DQL, Tran VD (2022) The use of insulin in treatment for inpatients with diabetes in Can Tho, Vietnam 2017 to 2020. J Pharm Pharmacogn Res 10(1): 84–93.

© 2022 Journal of Pharmacy & Pharmacognosy Research (JPPRes)

Apoptotic potential of Ruta chalepensis essential oil



J Pharm Pharmacogn Res 10(1): 73-83, 2022.

Original Article

Induction of apoptosis by Ruta chalepensis L. essential oil in human breast cancer cells (MCF-7)

[Inducción de apoptosis por el aceite esencial de Ruta chalepensis L. en células de cáncer de mama humano (MCF-7)]

Arwa R. Althaher1,2*, Sawsan A. Oran2, Yasser K. Bustanji3,4

1Department of Pharmacy, Al-Zaytoonah University of Jordan, Amman, 11733, Jordan.

2Department of Biological Sciences, The University of Jordan, Amman, 11942, Jordan.

3Department of Basic Medical Sciences, University of Sharjah, Sharjah, 27272, United Arab Emirates.

4Department of Biopharmaceutics and Clinical Pharmacy, The University of Jordan, Amman, 11942, Jordan.

*E-mail: a.althaher@outlook.com

Abstract

Context: Recent scientific studies have reported that essential oils induce apoptosis in various cancer cell types by interfering with intracellular signaling pathways.

Aims: To evaluate the cytotoxicity, the apoptotic activity of essential oil (EO) of Ruta chalepensis L. against MCF-7 cell line.

Methods: Cytotoxicity was determined using methyl thiazol tetrazolium assay. The apoptotic activity of EO was analyzed using annexin V-fluorescein isothiocyanate/propidium iodide binding flow cytometry. The cell morphology was inspected under an inverted microscope. DAPI staining assay was used for the morphological observation. Activation of caspases-3/7, -8, and-9 was assessed using a caspase assay kit.

Results: Ruta chalepensis essential oil significantly inhibited the proliferation of MCF-7 cells at 72 h. Moreover, the results showed that cell death is associated with the apoptotic process, and the number of apoptotic cells was significantly increased in the groups treated with EO than in control cells. The main morphological hallmarks of apoptosis in the nucleus were membrane blebbing, chromatin condensation, and nuclear fragmentation. Also, R. chalepensis EO-induced apoptosis in the MCF-7 cell line was via the extrinsic caspase-8 dependent pathway in a dose and time-dependent manner.

Conclusions: Ruta chalepensis essential oil demonstrated significant apoptotic activity against experimental breast carcinoma. Therefore, it could be introduced as a suitable candidate for breast cancer therapy after further investigation.

Keywords: apoptosis; caspases; DAPI staining assay; flow cytometry; Ruta chalepensis.

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Resumen

Contexto: Estudios científicos recientes han informado que los aceites esenciales inducen la apoptosis en varios tipos de células cancerosas al interferir con las vías de señalización intracelular.

Objetivos: Evaluar la citotoxicidad, la actividad apoptótica del aceite esencial (EO) de Ruta chalepensis L. contra la línea celular MCF-7.

Métodos: La citotoxicidad se determinó mediante el ensayo de metil tiazol tetrazolio. La actividad apoptótica de EO se analizó mediante citometría de flujo de unión de anexina V-isotiocianato de fluoresceína/yoduro de propidio. La morfología celular se inspeccionó con un microscopio invertido. Se utilizó el ensayo de tinción DAPI para la observación morfológica. La activación de las caspasas-3/7, -8 y-9 se evaluó usando un kit de ensayo de caspasas.

Resultados: El EO de Ruta chalepensis inhibió significativamente la proliferación de células MCF-7 a las 72 h. Además, los resultados mostraron que la muerte celular está asociada con el proceso apoptótico, y el número de células apoptóticas aumentó significativamente en los grupos tratados con EO que en las células de control. Las principales características morfológicas de la apoptosis en el núcleo fueron la formación de ampollas en la membrana, la condensación de cromatina y la fragmentación nuclear. Además, la apoptosis inducida por EO de R. chalepensis en la línea celular MCF-7 fue a través de la vía extrínseca dependiente de caspasa-8 de una manera dependiente de la dosis y el tiempo.

Conclusiones: El aceite esencial de Ruta chalepensis demostró una actividad apoptótica significativa contra el carcinoma de mama experimental. Por lo tanto, podría presentarse como un candidato adecuado para la terapia del cáncer de mama después de una investigación adicional.

Palabras Clave: apoptosis; caspasas; citometría de flujo; ensayo de tinción DAPI; Ruta chalepensis.

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Citation Format: Althaher AR, Oran SA, Bustanji YK (2022) Induction of apoptosis by Ruta chalepensis L. essential oil in human breast cancer cells (MCF-7). J Pharm Pharmacogn Res 10(1): 73–83.

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Zanthoxylum rhetsa: A systematic review



J Pharm Pharmacogn Res 10(1): 52-72, 2022.

Review

Zanthoxylum rhetsa (Roxb.) DC: A systematic review on traditional uses, phytochemistry, and pharmacology

[Zanthoxylum rhetsa (Roxb.) DC: Una revisión sistemática sobre usos tradicionales, fitoquímica y farmacología]

Farina Aziz1*, Fahad Imtiaz Rahman1, Sumaiya Huque1, Sadia Afruz Ether2, Choudhury Mahmood Hasan3, Monira Ahsan3

1Department of Pharmacy, University of Asia Pacific, Dhaka 1205, Bangladesh.

2Department of Pharmacy, Daffodil International University, Dhaka 1207, Bangladesh.

3Department of Pharmaceutical Chemistry, University of Dhaka, Dhaka 1000, Bangladesh.

*E-mail: farina@uap-bd.edu

Abstract

Context: Zanthoxylum rhetsa (Roxb.) DC is a plant rich in essential oils, terpenes, coumarins, and alkaloids, among others, and has traditionally been used by tribal healers for decades. But as yet, there is no systematic and critical review on this plant to document the phytochemistry and pharmacological properties of its isolated compounds.

Aims: To systematically review reports about the ethnobotany, phytochemistry, pharmacological effects and clinical trials of the plant. It also attempts to provide critical assessment of the existing knowledge and research gaps.

Methods: Science Direct, PubMed, Wiley Online Library, and Google Scholar were used to collect the relevant research performed on Z. rhetsa, and the discussed dataset finally included 48 articles.

Results: The plant has been used traditionally to treat fever, pain, dysentery, cholera, eczema, and rheumatism, among others. Z. rhetsa was found to be abundant in terpenes, coumarins, lignans, alkaloids with broad pharmacological effects, including anti-photo aging, antimicrobial, anti-inflammatory, cytotoxic, antidiarrheal, anthelmintic activities. Studies also revealed its potential use as a food supplement rich in ALA and a functional ingredient in food as a spice. Most pharmacological studies were grounded on crude extracts of the plant, and there is a lack of evidence-based bioactivity-guided research to identify the bioactive compounds. Several research priorities have also been identified, which need to be addressed in the future.

Conclusions: Overall, the review attempts to critically assess the existing knowledge and research gaps that can contribute toward improving the prospect of Z. rhetsa as a source of lead molecules in drug discovery.

Keywords: essential oils; Indian prickly ash; terpenes.

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Resumen

Contexto: Zanthoxylum rhetsa (Roxb.) DC es una planta rica en aceites esenciales, terpenos, cumarinas y alcaloides, entre otros y ha sido utilizada tradicionalmente por curanderos tribales durante décadas. Pero hasta el momento, no existe una revisión sistemática y crítica de esta planta para documentar las propiedades fitoquímicas y farmacológicas de sus compuestos aislados.

Objetivos: Revisar sistemáticamente los informes actualizados sobre la etnobotánica, fitoquímica, efectos farmacológicos y ensayos clínicos de la planta. También intenta proporcionar una evaluación crítica de los conocimientos existentes y las lagunas de investigación.

Métodos: Science Direct, PubMed, Wiley Online Library y Google Scholar se utilizaron para recopilar la investigación relevante realizada sobre Z. rhetsa, y el conjunto de datos discutido finalmente incluyó 48 artículos.

Resultados: La planta se ha utilizado tradicionalmente para tratar fiebre, dolor, disentería, cólera, eczema y reumatismo, entre otros. Se encontró que Z. rhetsa es abundante en terpenos, cumarinas, lignanos, alcaloides con amplios efectos farmacológicos que incluyen actividades antienvejecimiento, antimicrobianas, antiinflamatorias, citotóxicas, antidiarreicas y antihelmínticas. Los estudios también revelaron su uso potencial como complemento alimenticio rico en ALA y como ingrediente funcional en los alimentos como especia. La mayoría de los estudios farmacológicos se basaron en extractos crudos de la planta y hay una falta de investigación guiada por bioactividad basada en evidencia para identificar los compuestos bioactivos. También han sido identificadas varias prioridades de investigación que deben abordarse en el futuro.

Conclusiones: En general, la revisión intenta evaluar críticamente el conocimiento existente y las brechas de investigación que pueden contribuir a mejorar la perspectiva de Z. rhetsa como fuente de moléculas líderes en el descubrimiento de fármacos.

Palabras Clave: aceites esenciales; ceniza espinosa de la India; terpenos.

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Citation Format: Aziz F, Rahman FI, Huque S, Ether SA, Hasan CM, Ahsan M (2022) Zanthoxylum rhetsa (Roxb.) DC: A systematic review on traditional uses, phytochemistry, and pharmacology. J Pharm Pharmacogn Res 10(1): 52–72.

© 2022 Journal of Pharmacy & Pharmacognosy Research (JPPRes)

Piper cubeba extract on triple negative breast cancer



J Pharm Pharmacogn Res 10(1): 39-51, 2022.

Original Article

Anticancer activity of Piper cubeba L. extract on triple negative breast cancer MDA-MB-23

[Actividad anticancerígena del extracto de Piper cubeba L. en el cáncer de mama triple negativo MDA-MB-231]

Saowanee Maungchanburi1, Thidarath Rattanaburee1, Yaowapa Sukpondma2, Aman Tedasen3, Varomyalin Tipmanee1, Potchanapond Graidist1*

1Department of Biomedical Sciences and Biomedical Engineering, Faculty of Medicine, Prince of Songkla University, Songkhla, Thailand.

2Division of Physical Science and Center of Excellence for Innovation in Chemistry, Faculty of Sciences, Prince of Songkla University, Songkhla, Thailand.

3School of Allied Health Sciences, Walailak University, Thasala District, Nakhonsithammarat, Thailand.

*E-mail: gpotchan@medicine.psu.ac.th

Abstract

Context: Piper cubeba L. (family Piperaceae) is used traditionally for the treatment of many diseases, including cancer.

Aims: To determine the anticancer activity of P. cubeba crude extracts on cancer cells and identify chemical constituents of the active fraction.

Methods: Seeds of P. cubeba were sequentially extracted with dichloromethane followed by methanol and purified using column chromatography. Fractions were screened the cytotoxicity against triple negative breast cancer (MDA-MB-468) using MTT assay. Then, active fractions were evaluated cytotoxicity against breast cancer (MCF-7 and MDA-MB-231), colon cancer (HT-29), cholangiocarcinoma (KKU-M213) and normal fibroblast (L929) cells. Total phenolic, tannin, and flavonoid contents of active fraction were investigated, and the chemical composition was analyzed using GC-MS. Flow cytometry was applied to determine the cell cycle, apoptosis, and evidence of caspase activation.

Results: Fraction DE14 and DE15 showed cytotoxic activity against MDA-MB-468. Fraction DE15 exhibited the most potent cytotoxicity against MDA-MB-231, KKU-M213, HT-29 and L929. As the fraction DE15 was of dichloromethane extraction, major contents were nonpolar fatty acids and fatty acid esters, followed by propylene glycol and hydrocarbons. The phenolic compounds were however traceable, leading to their measurable antioxidant property. This extract did not cause cell cycle arrest on MDA-MB-231. However, fraction DE15 significantly increased apoptotic cells at 48 and 72 h, and significantly induced multi-caspases activity on MDA-MB-231 in a time-dependent manner.

Conclusions: Fraction DE15 exhibited cytotoxicity effect and induced apoptosis on triple negative breast cancer and showed less toxicity on normal fibroblast cells.

Keywords: Piper cubeba; anticancer; apoptosis; triple negative breast cancer.

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Resumen

Contexto: Piper cubeba L. (familia Piperaceae) es utilizado tradicionalmente para el tratamiento de muchas enfermedades, incluido el cáncer.

Objetivos: Determinar la actividad anticancerígena de extractos crudos de P. cubeba sobre células cancerosas e identificar los componentes químicos de la fracción activa.

Métodos: Se extrajeron semillas de P. cubeba con diclorometano seguido de metanol y se purificaron mediante cromatografía en columna. Se examinó la citotoxicidad de las fracciones frente al cáncer de mama triple negativo (MDA-MB-468) usando un ensayo MTT. Luego, se evaluó la citotoxicidad de las fracciones activas frente a células de cáncer de mama (MCF-7 y MDA-MB-231), cáncer de colon (HT-29), colangiocarcinoma (KKU-M213) y fibroblasto normal (L929). Se investigó el contenido total de fenólicos, taninos y flavonoides de la fracción activa y se analizó la composición química mediante GC-MS. Se aplicó citometría de flujo para determinar el ciclo celular, la apoptosis y la evidencia de activación de caspasa.

Resultados: Las fracciones DE14 y DE15 mostraron actividad citotóxica contra MDA-MB-468. La fracción DE15 exhibió la citotoxicidad más fuerte contra MDA-MB-231, KKU-M213, HT-29 y L929. La composición de la fracción DE15, extraída con diclorometano, fue de ácidos grasos apolares y ésteres de ácidos grasos, seguidos de propilenglicol e hidrocarburos. Sin embargo, los compuestos fenólicos fueron detectados, lo que llevó a su propiedad antioxidante medible. Este extracto no provocó la detención del ciclo celular en MDA-MB-231. Sin embargo, la fracción DE15 aumentó significativamente las células apoptóticas a las 48 y 72 h, e indujo significativamente la actividad de caspasas múltiples en MDA-MB-231 de una manera dependiente del tiempo.

Conclusiones: La fracción DE15 exhibió efecto de citotoxicidad e indujo apoptosis en cáncer de mama triple negativo y mostró menos toxicidad en células de fibroblastos normales.

Palabras Clave: anticáncer; apoptosis; cáncer de mama triple negativo; Piper cubeba.

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Citation Format: Maungchanburi S, Rattanaburee T, Sukpondma Y, Tedasen A, Tipmanee V, Graidist P (2022) Anticancer activity of Piper cubeba L. extract on triple negative breast cancer MDA-MB-231. J Pharm Pharmacogn Res 10(1): 39–51.

© 2022 Journal of Pharmacy & Pharmacognosy Research (JPPRes)

Calotropis procera antidiabetic activity according extraction method



J Pharm Pharmacogn Res 10(1): 30-38, 2022.

Original Article

Impact of extraction mode on phytoconstituents and antidiabetic activity of extracts of Calotropis procera (Aiton) Dryand.

[Impacto del modo de extracción en los fitoconstituyentes y la actividad antidiabética de los extractos de Calotropis procera (Aiton) Dryand.]

Sadaf Iftikhar1*, Khalid Hussain1, Muhammad Saleem2, Naureen Shehzadi1, Farhat Saghir1, Ayisha Shaukat1, Surriya Naheed 1, Sidra Siddique1

1Department of Pharmaceutical Chemistry, Punjab University College of Pharmacy, University of the Punjab, Lahore, Pakistan.

2 Department of Pharmacology, Punjab University College of Pharmacy, University of the Punjab, Lahore, Pakistan.

*E-mail: principal.pharmacy@pu.edu.pk, sadafahsan67@gmail.com

Abstract

Context: The extraction mode plays a key role in extracting a particular type of pharmacologically active compounds that can be isolated as leads to develop novel therapeutic molecules.

Aims: To evaluate the impact of extraction mode on extract yield, phytochemicals constituents, and antidiabetic activity of different parts of the Calotropis procera.

Methods: The different parts extracts were prepared by maceration and Soxhlet extraction. The resulting extracts were subjected to determining phytochemical constituents and antidiabetic activity using in vitro models (inhibition of alpha-amylase, glucose uptake by yeast cell, and inhibition of non-enzymatic Hb-glycation).

Result: The yield of extracts was higher in Soxhlet extraction in both solvents compared to maceration. Likewise, methanol extract of all the parts prepared by Soxhlet extraction exhibited higher contents of total polyphenols and tannins (430.2 ± 0.99 and 228.3 ± 3.8, respectively). On the other hand, total flavonoids and terpenoids were more in all parts prepared by maceration. The extract of flower and stem prepared by maceration exhibited 64.87 ± 0.720%, 70.32 ± 0.75%, and 56.86 ± 0.13% antidiabetic activity in alpha-amylase enzyme, non – enzymatic Hb glycation inhibition, and glucose enhancement in yeast, respectively (p<0.05) as compared to standards. The IC50 of alpha-amylase inhibitory assay and non-enzymatic Hb-glycation was 600 µg/mL and 420 µg/mL, respectively, and EC50 for glucose uptake assay was 400 µg/mL.

Conclusions: This study revealed that maceration extracts with higher flavonoid and terpenoid content have higher antidiabetic action than Soxhlet extracts. This study will assist in the future for the isolation of antidiabetic compounds from the plant.

Keywords: antidiabetic activity; Calotropis procera; maceration; phytochemical constituents; Soxhlet extraction.

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Resumen

Contexto: El modo de extracción juega un papel clave en la extracción de un tipo particular de compuestos farmacológicamente activos que pueden aislarse como conductos para desarrollar nuevas moléculas terapéuticas.

Objetivos: Evaluar el impacto del modo de extracción en el rendimiento del extracto, los componentes fitoquímicos y la actividad antidiabética de diferentes partes de Calotropis procera.

Métodos: Los extractos de las diferentes partes se prepararon mediante maceración y extracción Soxhlet. Los extractos resultantes se sometieron a la determinación de constituyentes fitoquímicos y actividad antidiabética utilizando modelos in vitro (inhibición de alfa amilasa, captación de glucosa por células de levadura e inhibición de glicación de Hb no enzimática).

Resultados: Se encontró que el rendimiento de extractos fue mayor en la extracción Soxhlet en ambos solventes en comparación con la maceración. Asimismo, el extracto metanólico de todas las partes elaborado por extracción Soxhlet presentó mayores contenidos de polifenoles totales y taninos (430.2 ± 0.99 and 228.3 ± 3.8, respectivamente). Por otro lado, los flavonoides totales y terpenoides fueron más en todas las partes, preparados por maceración. El extracto de flor y tallo preparado por maceración exhibió 64,87 ± 0,720%, 70,32 ± 0,75% y 56,86 ± 0,13% de actividad antidiabética en la enzima alfa amilasa, inhibición de la glucosilación de Hb no enzimática y mejora de la glucosa en levadura respectivamente (p<0,05) en comparación a los estándares.

Conclusiones: Este estudio reveló que los extractos de maceración con mayor contenido de flavonoides y terpenoides tienen mayor acción antidiabética que los extractos de Soxhlet. Este estudio ayudará en el futuro a aislar compuestos antidiabéticos de plantas.

Palabras Clave: actividad antidiabética; Calotropis procera; constituyentes fitoquímicos; extracción Soxhlet; maceración.

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Citation Format: Iftikhar S, Hussain K, Saleem M, Shehzadi N, Saghir F, Shaukat A, Naheed S, Siddique S (2022) Impact of extraction mode on phytoconstituents and antidiabetic activity of extracts of Calotropis procera (Aiton) Dryand. J Pharm Pharmacogn Res 10(1): 30–38.

© 2022 Journal of Pharmacy & Pharmacognosy Research (JPPRes)

Ethnobotanical study in Moulay Yacoub, Morocco



J Pharm Pharmacogn Res 10(1): 13-29, 2022.

Original Article

Ethnobotanical study of plants used for medicinal, cosmetic, and food purposes in the region of Moulay Yacoub, Northeast of Morocco

[Estudio etnobotánico de plantas utilizadas con fines medicinales, cosméticos y alimenticios en la región de Moulay Yacoub, noreste de Marruecos]

Mostafa El Khomsi1*, Yousra Dandani1, Noureddine Chaachouay2, Driss Hmouni1

1Natural Resources and Sustainable Development Laboratory, Department of Biology, Faculty of Sciences, Ibn Tofail University, B.P. 133 14000, Kenitra, Morocco.

2Higher Education and Training School, Berrechid, University Hassan 1st, 50 Rue Ibnou Lhaytham B.P. 577 26002, Settat, Morocco.

*E-mail: elkhomsi.mostafa@uit.ac.ma, mostafa.elkhomsi.durant@gmail.com

Abstract

Context: Medicinal and aromatic plants are used by people for various purposes, whether for health care, beauty, or as a food source.

Aims: To valorize the knowledge about their uses, therapeutic, cosmetic, and food.

Methods: The ethnobotanical study was conducted from November 1, 2019, to March 1, 2021, in the Moulay Yacoub region. A total of 407 local informants were interviewed. The methodological approach was open-ended and semi-structured interviews with open-ended questions based on therapeutic, cosmetic, and dietary criteria. Quantitative analyses were performed using basic statistics, use value (UV), family use value (FUV), plant part value (PPV), and informant agreement ratio (IAR).

Results: A total of 104 plant species belonging to 46 families were identified. The majority of plants are used in phytotherapy (78.30%). The most frequent ailments reported were digestive (IAR = 0.9). The most used method of preparation was infusion (42.68%), the leaves were the most used part of the plant (PPV = 0.45), and Anchusa italica Retz (UV = 0.196) was the most commonly prescribed species by local herbalists, and Oleaceae (FUV = 0.16) was the most dominant family.

Conclusions: This study showed the richness of the plants and the consistency of the knowledge of the natives on medicinal and aromatic plants. As part of this study, we are currently working on plants with curative effects to prove their efficacy in animal models, including Anchusa italica Retz, which was widely cited in this ethnobotanical study. Authors invite scientists to conduct further phytochemical and pharmacological research on medicinal plants from this region based on this study.

Keywords: food; medicinal and aromatic plants; Moulay Yacoub; phytocosmetics; phytotherapy.

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Resumen

Ethnobotanical study of plants used for medicinal, cosmetic, and food purposes in the region of Moulay Yacoub, Northeast of Morocco

Contexto: Las personas utilizan plantas medicinales y aromáticas para diversos fines, ya sea para el cuidado de la salud, la belleza o como fuente de alimento.

Objetivos: Valorar el conocimiento sobre sus usos, terapéuticos, cosméticos y alimentarios.

Métodos: El estudio etnobotánico se realizó del 1 de noviembre de 2019 al 1 de marzo de 2021 en la región de Moulay Yacoub. Se entrevistó a un total de 407 informantes locales. El abordaje metodológico fue entrevistas abiertas y semiestructuradas con preguntas abiertas basadas en criterios terapéuticos, cosméticos y dietéticos. Se realizaron análisis cuantitativos utilizando estadísticas básicas, valor de uso (UV), valor de uso familiar (FUV), valor de parte de la planta (PPV) y razón de acuerdo de informantes (IAR).

Resultados: Se identificaron un total de 104 especies de plantas pertenecientes a 46 familias. La mayoría de las plantas se utilizan en fitoterapia (78,30%). Las dolencias más frecuentes reportadas fueron las digestivas (IAR = 0,9). El método de preparación más utilizado fue la infusión (42,68%), las hojas fueron la parte más utilizada de la planta (VPP = 0,45), y Anchusa italica Retz (UV = 0,196) fue la especie más prescrita por los herbolarios locales, y Oleaceae (FUV = 0,16) fue la familia más dominante.

Conclusiones: Este estudio mostró la riqueza de las plantas y la consistencia del conocimiento de los nativos sobre plantas medicinales y aromáticas. Como parte de este estudio, actualmente se trabaja en plantas con efectos curativos para demostrar su eficacia en modelos animales, incluida Anchusa italica Retz, que fue ampliamente citada en este estudio etnobotánico. Los autores invitan a los científicos a realizar más investigaciones fitoquímicas y farmacológicas sobre plantas medicinales de esta región con base en este estudio.

Palabras Clave: extracción; cicatrización de herida; formulación; Linum usitatissimum; revisión sistemática; semilla de lino.

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Citation Format: El Khomsi M, Dandani Y, Chaachouay N, Hmouni D (2022) Ethnobotanical study of plants used for medicinal, cosmetic, and food purposes in the region of Moulay Yacoub, Northeast of Morocco. J Pharm Pharmacogn Res 10(1): 13–29.

© 2022 Journal of Pharmacy & Pharmacognosy Research (JPPRes)

Wound healing ability of flaxseed extracts



J Pharm Pharmacogn Res 10(1): 1-12, 2022.

Review

Systematic review of flaxseed (Linum usitatissimum L.) extract and formulation in wound healing

[Revisión sistemática sobre extracto y formulación de linaza (Linum usitatissimum L.) en la cicatrización de heridas]

Abdul Talib Mat Sharil1, Mustafa Basma Ezzat2, Lestari Widya2, Mat Husin Amri Nurhakim1, Ab Razak Nor Hikmah2, Zainon Nabilah Zafira2, Muhammad Salahuddin Haris1*

1Department of Pharmaceutical Technology, Kulliyyah of Pharmacy, International Islamic University Malaysia, Jalan Sultan Ahmad Shah, 25200 Kuantan, Pahang, Malaysia.

2Department of Fundamental Dental and Medical Sciences, Kulliyyah of Dentistry, International Islamic University Malaysia, Jalan Sultan Ahmad Shah, 25200, Kuantan, Pahang, Malaysia.

*E-mail: solah@iium.edu.my

Abstract

Context: Flaxseed constituents provide to antioxidant, anti-inflammatory, antimicrobial and wound healing benefits.

Aims: To systematically review the experimental evidence on the wound healing ability of flaxseed extracts and formulations.

Methods: Comprehensive searches in six databases (Scopus, Science Direct, Web of Science, PubMed, Google Scholar and Dimensions) were carried out from the beginning of databases until December 2020, according to Preferred Reporting Items for Systematic Reviews and Meta-Analyses (PRISMA) protocol. The terms used in searches were (Linum usitatissimum L., flaxseed, linseed, flax) AND (extract) AND (wound heal, heal, heal type, wound) for collection of articles, with only articles in English and research articles were included. Transgenic term were excluded. AXIS tool was chosen to assess the quality and risk of bias. The data were then categorised in term of extracts, laboratory formulation, and wound healing.

Results: In total, 999 articles were collected and screened based on the pre-determined inclusion and exclusion criteria. Finally, 10 articles were included in the review. The majority of publications reported significant findings of flaxseed oil on wound healing regardless of extraction method and formulation. Healing parameters on excision, incision, and burn wound models were studied. Lack of laboratory formulation mentioned in the collected articles gave limitation impact on this study.

Conclusions: Flaxseed oil formulation appears to exert a positive effect on wound healing. Therefore, extensive studies needed to evaluate the transportation of flaxseed phytochemicals into skin dermis by advanced drug formulation.

Keywords: extraction; flaxseed; formulation; Linum usitatissimum L.; systematic review; wound healing.

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Resumen

Contexto: Los componentes de la linaza proporcionan beneficios antioxidantes, antiinflamatorios, antimicrobianos y de cicatrización de heridas.

Objetivos: Revisar sistemáticamente las evidencias experimentales sobre la capacidad de cicatrización de heridas de los extractos y formulaciones de linaza.

Métodos: Se realizaron búsquedas integrales en seis bases de datos (Scopus, Science Direct, Web of Science, PubMed, Google Scholar y Dimensions) desde el inicio de las bases de datos hasta diciembre de 2020, según Preferred Reporting Items for Systematic Reviews and Meta-Analyzes (PRISMA) protocolo. Los términos utilizados en las búsquedas fueron (Linum usitatissimum L., flaxseed, linseed, flax) AND (extracto) AND (herida curar, curar, curar tipo, herida) para la colección de artículos, con solo artículos en inglés y se incluyeron artículos de investigación. Se excluyeron los términos transgénicos. Se eligió la herramienta AXIS para evaluar la calidad y el riesgo de sesgo. Luego, los datos se clasificaron en términos de extractos, formulación de laboratorio y cicatrización de heridas.

Resultados: En total, se recopilaron y seleccionaron 999 artículos según los criterios de inclusión y exclusión predeterminados. Finalmente, se incluyeron 10 artículos en la revisión. La mayoría de las publicaciones informaron hallazgos significativos del aceite de linaza en la cicatrización de heridas, independientemente del método de extracción y la formulación. Se estudiaron los parámetros de curación en modelos de escisión, incisión y quemaduras. La falta de formulación de laboratorio mencionada en los artículos recopilados dio un impacto de limitación en este estudio.

Conclusiones: La formulación de aceite de linaza parece ejercer un efecto positivo en la cicatrización de heridas. Por lo tanto, se necesitaban estudios extensos para evaluar el transporte de fitoquímicos de la linaza a la dermis de la piel mediante una formulación avanzada de fármacos.

Palabras Clave: extracción; cicatrización de herida; formulación; Linum usitatissimum; revisión sistemática; semilla de lino.

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Citation Format: Mat Sharil AT, Basma Ezzat M, Widya L, Amri Nurhakim MH, Nor Hikmah AR, Nabilah Zafira Z, Haris MS (2022) Systematic review of flaxseed (Linum usitatissimum L.) extract and formulation in wound healing. J Pharm Pharmacogn Res 10(1): 1–12.

© 2022 Journal of Pharmacy & Pharmacognosy Research (JPPRes)