J. Pharm. Pharmacogn. Res., vol. 14, no. 1, Article ID 2205, Jan-Feb 2026.
DOI: https://doi.org/10.56499/jppres_14.1.2205Original Article
Validación microbiológica de un desinfectante de superficies de amonio cuaternario al 0,25% mediante el método de dilución-neutralización
[Microbiological validation of a 0.25% quaternary ammonium surface disinfectant using the dilution-neutralisation method]
Ambrocio T. Esteves Pairazaman1*, Jesús D. Collanque Pinto2, Veronica L. Esteves Cárdenas1, Elmer Oyarce Alvarado2, Jose Rincon Chavez2, Carmela G. Barboza Justiniano3, Nelcy O. Quintana Marquez2, Daniel R. Reyes Villalobos2
1Escuela de Posgrado, Universidad Católica de Trujillo Benedicto XVI, Trujillo, Perú.
2Facultad de Farmacia y Bioquímica, Universidad Privada Norbert Wiener, Lima, Perú.
3Facultad de Farmacia y Bioquímica, Universidad Peruana Cayetano Heredia, Lima, Perú.
*E-mail: aesteves@inudi.edu.pe
Abstract
Context: The validation of microbiological methods in medical devices is key to ensuring patient safety and the efficacy of healthcare products. These types of studies respond to the need to comply with international regulatory requirements and ensure the quality of analytical techniques.
Aims: To validate the analytical technique of microbial count by dilution-neutralisation of 0.25% quaternary ammonium.
Methods: Deductive, applied, quantitative and experimental, method, consisting of six batches of three samples with different percentages of cake enriched with oyster mushroom (Pleurotus ostreatus) and 30 panelists of different ages and genders where a checklist was applied for data collection.
Results: The results obtained count lower than 100 CFU for the strains Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Bacillus subtilis ATCC 6633, Candida albicans ATCC 10231, and Aspergillus brasiliensis ATCC 16404. The proficiency test successfully recovered all the test microorganisms in the 10-2 dilution, presenting growth and identification of specific microorganisms. Validation of the neutralisation method showed adequate efficacy of the neutraliser at the 10-2 dilution and demonstrated the absence of toxicity of the neutraliser. The accuracy of the recovery percentages was within the 90% confidence interval, the precision of the test was <15% of the coefficient of variation, and it was demonstrated that the neutralisers used were specific to inhibit the antimicrobial properties of quaternary ammonium. The limit of detection recovered Pseudomonas aeruginosa >11 CFU and Staphylococcus aureus >17 CFU, robustness demonstrated that there was no significant variability in the counts, at different incubation times.
Conclusions: The dilution method - neutralisation with soy lecithin 0.5% and polysorbate 80 4%, allowed the recovery of the test microorganisms at the 10-2 dilution.
Keywords: dilution; microbial enumeration; neutralization; validation.
Resumen
Contexto: La validación de métodos microbiológicos en dispositivos médicos es clave para garantizar la seguridad del paciente y la eficacia de los productos sanitarios. Este tipo de estudios responde a la necesidad de cumplir con exigencias regulatorias internacionales y asegurar la calidad de las técnicas analíticas.
Objetivos: Validar la técnica analítica de recuento microbiano, mediante la dilución-neutralización del amonio cuaternario al 0,25%.
Métodos: Método deductivo, aplicado, cuantitativo y experimental, utilizando como método de vertido en placa para la recuperación de microorganismos de prueba, para el desarrollo de los parámetros estadísticos se utilizaron los softwares SPSS y Minitab.
Resultados: Los resultados obtuvieron recuentos menores a 100 UFC para las cepas Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Bacillus subtilis ATCC 6633, Candida albicans ATCC 10231 y Aspergillus brasiliensis ATCC 16404. La prueba de aptitud recuperó todos los microorganismos de prueba en la dilución 10-2 y presentó crecimiento e identificación de microorganismos específicos. La validación del método de neutralización evidenció eficacia adecuada del neutralizante en la dilución 10-2 y, a su vez, se demuestra la ausencia de toxicidad del neutralizante. La exactitud de los porcentajes de recuperación estuvo dentro del intervalo de confianza del 90%. La precisión del ensayo se encontró <15% del coeficiente de variación. A su vez, se demostró que los neutralizantes utilizados fueron específicos para inhibir las propiedades antimicrobianas del amonio cuaternario. El límite de detección recuperó Pseudomonas aeruginosa > 11 UFC y Staphylococcus aureus >17 UFC. La robustez demostró que no existe variabilidad significativa en los recuentos en distintos tiempos de incubación.
Conclusiones: El método de dilución – neutralización con lecitina de soya 0,5% y polisorbato 80 4%, permitió la recuperación de los microorganismos de prueba en la dilución 10-2.
Palabras Clave: dilución; neutralización; recuento microbiano; validación.
Citation Format: Esteves AT, Collanque JD, Esteves VL, Oyarce E, Rincon E, Barboza CG, Quintana NO, Reyes DR (2026) Validación microbiológica de un desinfectante de superficies de amonio cuaternario al 0,25% mediante el método de dilución-neutralización. [Microbiological validation of a 0.25% quaternary ammonium surface disinfectant using the dilution-neutralisation method]. J Pharm Pharmacogn Res 14(1): 2205. https://doi.org/10.56499/jppres_14.1.2205
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