Validación de ensayos de alto rendimiento

J Pharm Pharmacogn Res 2(1): 1-13, 2014.

Review | Revisión

Ensayos de alto rendimiento utilizados en farmacognosia: Selección, optimización y validación de métodos de inhibición enzimática por espectrofotometría UV-visible

[High-throughput screening assay used in pharmacognosy: Selection, optimization and validation of methods of enzymatic inhibition by UV-visible spectrophotometry]

Graciela Granados-Guzmán, Noemí Waksman de Torres, Rocío Castro-Ríos, Ricardo Salazar-Aranda*

Abstract

In research laboratories of both organic synthesis and extraction of natural products, every day a lot of products that can potentially introduce some biological activity are obtained. Therefore it is necessary to have in vitro assays, which provide reliable information for further evaluation in in vivo systems. From this point of view, in recent years has intensified the use of high-throughput screening assays. Such trials should be optimized and validated for accurate and precise results, i.e. reliable. The present review addresses the steps needed to develop and validate bioanalytical methods, emphasizing UV-Visible spectrophotometry as detection system. Particularly focuses on the selection of the method, the optimization to determine the best experimental conditions, validation, implementation of optimized and validated method to real samples, and finally maintenance and possible transfer it to a new laboratory.

Keywords: High-throughput screening assays; validation studies; in vitro.

Resumen

En los laboratorios de investigación, tanto de síntesis orgánica como de extracción de productos naturales, diariamente se obtienen una gran cantidad de productos que potencialmente pueden presentar alguna actividad biológica. Por esta razón es necesario contar con ensayos in vitro que proporcionen información confiable para continuar la evaluación en sistemas in vivo. Desde este punto de vista, durante los últimos años se ha intensificado el uso de ensayos de alto rendimiento. Dichos ensayos deben ser optimizados y validados para obtener resultados exactos y precisos, es decir confiables. En la presente revisión se abordan las etapas necesarias para desarrollar y validar métodos bioanalíticos, haciendo énfasis en la espectrofotometría Ultravioleta-Visible como sistema de detección. Particularmente se enfoca en la selección del método, la optimización para determinar las mejores condiciones experimentales, la validación, la aplicación del método optimizado y validado a muestras reales y, por último, el mantenimiento y posible transferencia de éste a un nuevo laboratorio.

Palabras Clave: Ensayos de rastreo de alto rendimiento; estudios de validación; in vitro.

Citation Format: Graciela Granados-Guzmán, Noemí Waksman de Torres, Rocío Castro-Ríos, Ricardo Salazar-Aranda (2014) Ensayos de alto rendimiento utilizados en farmacognosia: Selección, optimización y validación de métodos de inhibición enzimática por espectrofotometría UV-visible. [High-throughput screening assay used in pharmacognosy: Selection, optimization and validation of methods of enzymatic inhibition by UV-visible spectrophotometry]. J Pharm Pharmacogn Res 2(1): 1-13.

This article has been cited by:

Granados-Guzman G, Salazar-Aranda R, Garza-Tapia M, Castro-Rios R, Waksman de Torres N (2017) Optimization and validation of two high-throughput methods indicating antiradical activity. Current Analytical Chemistry 13(6): 499-507. DOI: 10.2174/1573411013666170118111516

Gabino Garrido (2014) El primer año y el desafío de Journal of Pharmacy & Pharmacognosy Research. J Pharm Pharmacogn Res 2(5): i-iii. Website

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